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當前位置:首頁技術文章赤點石斑魚神經壞死病毒RNA核酸檢測試劑盒使用及效果

赤點石斑魚神經壞死病毒RNA核酸檢測試劑盒使用及效果

更新時間:2020-04-07點擊次數:407

赤點石斑魚神經壞死病毒(RGNNV)RNA核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)使用及效果:將本產品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(PCR 參數由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。

使用方法 :   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材
                                             

1)PCR儀

2)PCR反應管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

赤點石斑魚神經壞死病毒(RGNNV)RNA核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)流程:

1. 整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器 、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。

3. 每次實驗應該設置陰、陽性對照。

4. 試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。

5. 試劑盒內所配陰性和陽性對照在一次使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。

7. 儀器 擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。

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