ATCC細胞建立一套適當的轉染方案;首先從一種標準方案開始，然后通過改變試劑/DNA的配比和形成復合物的數量進行優化。

轉染復合物的制備— 諸如轉染試劑/DNA配比，離子強度，緩沖液pH值，以及溫度等變量都會影響到轉染復合物的組成和功能。質粒既可在無菌水又可在TE緩沖液中稀釋。如果您要使用一種市售的轉染試劑，就應當仔細閱讀該試劑所提供的使用說明。需要對試劑提供方給予一定的信賴;除非您有很好的理由支持您做出改變，否則就應當嚴格按照他們所推薦的轉染方案。在不含血清或其他蛋白的培養基中制備轉染復合物;如果制備復合物所使用的培養基含有血清，它就會對轉染產生抑制。

制備轉染復合物的*孵育時間是一個非常關鍵的環節，對于不同的轉染試劑而言可能差別很大。

轉染試劑/DNA配比(負載比)—所有的轉染試劑都會在某一個試劑/DNA配比時zui為有效。有時候這種*配比的所在范圍非常狹窄;而且對于每種實驗體系都必須進行優化才能得到*配比。為了尋找這種*配比往往會花費大量的時間和金錢。

除了配比的重要性之外，所加入轉染復合物量的多少也非常關鍵。

ATCC細胞形成轉染復合物所用的稀釋劑—對于多數試劑而言，很關鍵的一點是要使轉染復合物能在普通基礎培養基和鹽溶液中形成。

FuGENE® HD 轉染試劑則是一個例外，因為它能在水中、不會血清的培養基中或含有10%血清的培養基中生成復合物。如果您使用的是水或含有10%血清的培養基，則應保證它能適用于你特定的細胞體系。

復合物數量—對轉染細胞所用的轉染試劑/DNA復合物的量也應當進行優化。如果用量太少，那么轉染DNA的表達就太弱;如果用量太多，則可能由于細胞毒性或其他作用反而降低蛋白的表達。*用量通常都必須進行實驗來確定。

所需要的轉染復合物用量與所用細胞的數量相關。轉染細胞越少，所需復合物就越少。

轉染復合物的加入—有兩種替換方法可用來漿轉染復合物加入轉染細胞：1. 將復合物濃縮液逐滴加入培養基，或者2. 將轉染復合物先用培養基稀釋，然后進行培養基更換操作。*種方法更簡便，而第二種方法則更因為避免了試劑在局部濃聚而產生毒性，所以會使結果的一致性更好。

對于諸如FuGENE® 6 轉染試劑和HD轉染試劑這類的溫和試劑而言，您可以先將轉染復合物加入培養容器，然后再加入用胰蛋白酶新鮮消化得到的細胞。

轉染培養基— 轉染過程中所使用的培養基對轉染效率可能會有正面或負面的影響。甚至對于基礎培養基配方而言也是如此，尤其是在培養基中加入牛血清的情況下。胎牛血清的存在會使多種轉染試劑的轉染效率降低. 某些公司還提供可與轉染試劑配合使用的優化無血清轉染培養基。而由羅氏應用科學部所提供的轉染試劑則無論是否存在血清都能有效轉染。

FuGENE® H D是*的能夠轉染保存在100%血清中腫瘤細胞的轉染試劑。

如果有抗生素(如，青霉素、鏈霉素、或兩性霉素B)存在的情況下培養ATCC細胞，則轉染有效性會降低至25%。因此，對于瞬時轉染，我們建議使用不加抗生素的培養基。

高密度聚乙烯Polyethylene, High Density9002-88-4

L-焦谷氨酸;L-焦性麩質酸;L-焦性膠氨酸;L-2-吡咯烷酮-5-羧酸L-PyroglutaMic acid;L-GlutiMinic acid;GlutiMic acid;GlutaMic acid lactaM;α- AMinoglutaric acid lactaM;L-5-Oxo-2-pyrrolidine carboxylic acid;(S)-(-)-2-Pyrrolidone-5-carboxylic acid98-79-3

L-蘇氨酸;L-異赤絲藻氨基酸L-Threonine;L-β-Hydroxy-2-aMinobutyric acid;(2S,3R)-2-AMino-3-hydroxybutyric acid;(2S,3R)-(-)-Threonine72-19-5

L-甲狀腺素鈉;L-甲狀腺胺鈉;3,5,3′,5′-四碘甲狀腺-L-原氨L-Thyroxine sodiuMsalt;3,3′,5,5′-Tetraiodo-L-thyronine sodiuM salt pentahydrate;SodiuM levothyroxine;Levothyroxine sodiuM;Eltroxin;Thyroxevan;25416-65-3

L-甲狀腺素;3,5,3′,5′-四碘-L-甲狀腺原氨酸;3-[4-(4-羥基-3,5-二碘苯氧基)-3,5-二碘苯基]-L-丙氨酸L-Thyroxine;3-[4-(4-Hydroxy-3,5-diiodophenoxy)-3,5-diiodophenyl]-L-alanine;β-[(3,5-Diiodo-4-hydroxyphenoxy)-3,5-diiodophenyl]-L-alanine51-49-0

L-酪氨酸;;;L-β-對羥苯基-α-氨基丙酸;L-干酪氨基酸L-Tyrosine;(S)-2-AMino-3-(4-hydroxyphenyl)propionic acid;3-(4-Hydroxyphenyl)-L-alanine;L-α-AMino-β-p-hydroxyphenylpropionic acid;L-α-AMino- p-hydroxyhydrocinnaMic acid60-18-4

淋巴細胞分離液LyMphocyte separation Media;

麥康凱瓊脂;麥康克瓊脂Mac Conkey agar;

氟化鎂MagnesiuM fluoride;Afluon;Sellaite7783-40-6

氫氧化鎂MagnesiuM Hydroxide (AS);Marinco H1309-42-8

硬脂酸鎂MagnesiuM Stearate (AS);DoloMol577-04-0

七水合硫酸鎂Magnesium sulfate10034-99-8

三硅酸鎂;三硅酸二鎂;硅酸鎂;弗羅里硅土;硅鎂型吸附劑MagnesiuM trisilicate;MagnesiuM silicate;MagnesiuM Mesotrisillicate14987-04-3

蘋果酸Malic Acid;4455-77-0

丙二酰胺MalonaMide;PropanediaMide;108-13-4

丙二腈 99％Malonic acid141-82-2

丙二腈;氰化亞甲基;二氰甲烷;氰基乙腈;縮蘋果腈Malonitrile;Methylene cyanide;DicyanoMethane;Cyanoacetonitrile109-77-3

acid;Phenylhydroxyacetic acid;Phenylglycolic acid;α-Hydroxybenzeneacetic acid;dl-Mandelic acid90-64-2