ATCC細胞毒試驗實在組織培養中研究淋巴細胞、抗體或抗體依賴性淋巴細胞殺傷靶細胞的一種技術,也是在體外研究特異性細胞免疫比較可靠和靈敏的方法,目前微量細胞毒試驗是應用zui廣的一種方法.
（一）淋巴細胞對腫瘤細胞的細胞毒試驗方法： 1) 腫瘤細胞培養物制成懸液,并稀釋至需要的細胞濃度. 2) 于微量試驗班的小孔內分別接種0.2ml腫瘤細胞（內含5×102）個細胞,37℃培育24h. 3) 細胞貼壁后,輕輕輕去培養基,加1mlPBS洗滌,輕去洗滌液及未貼壁細胞. 4) 向小孔分別加入0.2ml不同濃度的淋巴細胞（分別含有5×105個細胞,5×104個細胞,5×103個細胞）,使淋巴細胞與癌細胞之比依次為1000：1、100：1、10：1. 5) 45min后加0.1ml5%胎牛血清,37℃繼續培養2-3天. 6) 2%臺盼藍染色,翻轉微量試驗班,計數活存的腫瘤細胞,并設正常人淋巴細胞代替腫瘤患者淋巴細胞作對照,每份需同時做3個復孔,分別檢查各孔中存活活細胞數,按下列公式計算細胞毒率,并做t檢驗.
（二） 抗體加補體的細胞毒試驗方法： 此法是組織相容性抗原（HLA）檢查技術中zui常用的一種方法.也稱微量淋巴細胞毒試驗.人體的組織相容性抗原存在于淋巴細胞膜的表面,從供者與受者的血液分離淋巴細胞作為靶細胞,以各種定型單價抗血清與家兔血清補體作為效應系統.如果淋巴細胞表面具有與抗血清相對應的抗原,則淋巴細胞就會受損傷或致死而被臺盼藍染色. 1、 材料： a.淋巴細胞 b. 血清.小牛血清（56℃滅活30min） c.待測血清.收集多產婦分娩時的胎盤剝離后的血,分出血清,疊氮納防腐,4℃保存. d.已知陽性對照血清.用上海市中心血站制備的馬抗人淋巴細胞血清（ALS）,同時做1：3稀釋. e.補體.新鮮家兔混合血清,分裝小試管,保存于-20℃. 2、 操作步驟： a.在塑料試驗盒內加入醫用液體石蠟油20ml,放進一塊52孔微量玻璃試驗班,使板沉至盒底. b.用0.25ml的微量定量加液器分別加入待測血清和陽性對照血清2-2ul/孔,陰性對照用Hanks液代之.加樣針尖應磨平. c.用同法每孔內加入待測的淋巴細胞2-3ul,ATCC細胞應先加陰性對照和補體對照孔,然后加待測孔,zui后加陽性血清對照孔,加后輕搖使其混勻,置室溫作用1h. d.每孔加入兔補體5-7ul（按加淋巴細胞順序加入）,置37℃培育45min（或室溫作用1h）. e.每孔加入2%臺盼藍等滲液3-5ul室溫中靜置20min,吸去藍色上清. f.普通顯微鏡檢查,記錄每孔中死細胞（著色細胞）數. 死細胞.體積稍大,著藍色,無折光性. 活細胞.大小正常,未著色,較透亮. 判斷標準（每次實驗,需做3-6個復本）. 其中著色細胞：《=20%為陰性, 20%--50%為弱陽性, 50%--70%為陽性, 》=70%為強陽性.
4'-Cyanobenzylidene-4-ethoxyaniline    CAS號：    34128-02-4    質量規格：    4'-氰苯亞甲基-4-乙氧苯胺(>98.0%(T))    英文名稱：    >98.0%(T)    
4-Cyanobiphenyl    CAS號：    2920-38-9    質量規格：    4-氰基聯苯(>97.0%(GC))    英文名稱：    >97.0%(GC)    
4-Cyanophenyl 4-(3-Butenyloxy)benzoate    CAS號：    114482-57-4    質量規格：    4-(3-丁烯氧基)苯甲酸4-氰苯基酯(>97.0%(GC))    英文名稱：    >97.0%(GC)    
4-Cyanophenyl 4-Heptylbenzoate    CAS號：    38690-76-5    質量規格：    4-庚基苯甲酸-4-氰基苯酯(>98.0%(GC))    英文名稱：    >98.0%(GC)    
4-Decyloxybenzaldehyde    CAS號：    24083-16-7    質量規格：    4-癸氧基苯甲醛(>97.0%(GC))    英文名稱：    >97.0%(GC)    
4'-Decyloxybiphenyl-4-carboxylic Acid    CAS號：    69367-32-4    質量規格：    4'-癸氧基聯苯-4-羧酸(>98.0%(T))    英文名稱：    >98.0%(T)    
4'-Demethylepipodophyllotoxin    CAS號：    6559-91-7    質量規格：    4'-去甲氧基表鬼臼毒素（標準品）    英文名稱：    HPLC≥98%，標準品 
ATCC細胞