人胚肺成纖維細胞；HFL1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人胚肺成纖維細胞；HFL1圖片
形態特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞為穩定二倍體細胞。 
培養條件  F12K  10%FBS
傳代方法  1:4-1:6，每周換液2-3次
傳代情況 P16
凍存條件  90%FBS+10%DMSO
支原體檢測 
STR  Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:8；D16S539:9,11；D18S51:15；D21S11:31.2,32.2；D3S1358:15,17；D5S818:11,12；D7S820:11；D8S1179:12,14；FGA:21,24；PentaD:9,14；PentaE:21；TH01:6,9；TPOX:8；vWA:16
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

百萬堿基細菌 (G-)DNAout    10 次
百萬堿基細菌 (G+)DNAout    10 次
百萬堿基血液 DNAout    10 次
百萬堿基真菌 DNAout    10 次
百萬堿基植物 DNAout     10 次
半干法電轉液 ( 干粉 )    20L
半乳糖氧化酶    150U
半纖維素酶    15ku
包涵體大量純化試劑盒    2次
包涵體蛋白溶解及復性套裝    100 次
包涵體微量純化試劑盒    20 次
包涵體中量純化試劑盒    5次
胞嘧啶    5g
苯酚紅    5g
苯基介質    50mL
苯甲基磺    1g
崩潰酶    500mg
鼻腔采樣拭子     50 支
吡啰紅 G    5g
芐瞇鹽酸鹽    5gAB-CHMINACA metabolite M5A （1 mg）1-（（4-hydroxycyclohexyl）methyl）-1H-indazole-3-carboxylic acid
CBL-018 （10 mg）naphthalen-1-yl 1-pentyl-1H-indole-3-carboxylate
X-Gal5-bromo-4-chloro-3-indolyl-β-D-Galactopyranoside； 5-bromo-4-chloro-1H-indol-3-yl-β-D-galactopyranoside
BVT 948 （5 mg）4-hydroxy-3,3-dimethyl-2H-benz[g]indole-2,5（3H）-dione
LY2811376（4S）-4-[2,4-difluoro-5-（5-pyrimidinyl）phenyl]-5,6-dihydro-4-methyl-4H-1,3-thiazin-2-amine
Tesaglitazar （5 mg）AZ 242|GalidaTM； （αS）-ethoxy-4-[2-[4-[（methylsulfonyl）oxy]phenyl]ethoxy]-benzenepropanoic acid
Clinafloxacin （hydrochloride） （500 mg）AM1091； 7-（3-ami-pyrrolidinyl）-8-chloro-1-cyclopropyl-6-fluoro-1,4-dihydro-4-oxo-3-quinolinecarboxylic acid
Rosiglitazone （25 mg）BRL 49653； 5-[[4-[2-（methyl-2-pyridinylamino）ethoxy]phenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
Deltarasin （hydrochloride） （5 mg）2-[4-[（2S）-2-（2-phenyl-1H-benzimidazol-1-yl）-2-（4-piperidinyl）ethoxy]phenyl]-1-（phenylmethyl）-1H-benzimidazole, hydrochloride
Difenoxin （hydrochloride） （500 ug）Diphenoxylic Acid|R 15403； 1-（3-cyano-3,3-diphenylpropyl）-4-phenyl-4-piperidinecarboxylic acid, monohydrochloride
EC 23 （25 mg）AGN 190205|BASF 46928； 4-[2-（5,6,7,8-tetrahydro-5,5,8,8-tetramethyl-2-naphthalenyl）ethynyl]-benzoic acid
BLT1 Receptor Blocking Peptide （200 ug）BLTR1|LTB4 Receptor 1|Leukotriene B4 Receptor 1
AZD 24614-[[4-fluoro-3-[（4-methoxy-1-piperidinyl）carbonyl]phenyl]methyl]-1（2H）-Phthalazinone
單甲基化組蛋白H3K9多肽Monomethyl Histone H3K9 Peptide （100 ul）
Actinomycin C1， ActinomycinActinomycin D （10 mM）
變色硅膠    50g
冰袋    1個
丙二醛測試盒 / 脂質過氧化物測試盒    50 T
丙酮酸激酶    2mg