人乳腺癌細(xì)胞（上皮粘性蛋白基因修飾）；Ecad231-9圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人乳腺癌細(xì)胞（上皮粘性蛋白基因修飾）；Ecad231-9圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  E-Cadherin穩(wěn)定表達(dá) 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS；200ug/ml G418
傳代方法 
傳代情況 
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  Amelogenin：X；CSF1PO：12，13；D13S317：13；D16S539：12；D18S51：11，16；D19S433：11，14；D21S11：30，33.2；D2S1338：20，21；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：8，9；D8S1179：13；FGA：22，23；TH01：7，9.3；TPOX：8，9；vWA：15，18；
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來(lái)源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購(gòu)買(mǎi)到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過(guò)QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來(lái)源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問(wèn)題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

101117-50柱式植物 RNA-DNA 雙提試劑盒50 次
NdeI400U
5(6)-TRITC10mg
支氣道上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
X-Gal 干粉0.5g
21-0460-5滋養(yǎng)層細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
17-005-100010 μL RNase-free 白吸頭 ( 袋裝長(zhǎng)尖 )1000 支
Protein A+G 瓊脂糖2mL
BLOTTO 溶液100mL
Nutlin-3(MDM2 拮抗劑 )1mg
動(dòng)物線粒體純化試劑盒 ( 精提 )15 次
23-0580-2PD 98059(MAPKK 抑制劑 )2mg
130991-50柱式酵母 DNAout50 次
RNase A 溶液，2mg/mL1.5mL
超雜交液 ( 原位雜交 )10mLTETRAHYDRO-3-FURANMETHANOL3-四氫呋喃醇15833-61-1
2',3',4'-TRIHYDROXYACETOPHENONE2,3,4-三羥基乙528-21-2
BOC-SER(TOS)-OCH3BOC-SER(TOS)-OME56926-94-4
3,4,5-Trimethoxybenzyl alcohol3,4,5-三氧基芐醇3840-31-1
4-Nitrophenylhydrazine4-基肼100-16-3
(3aS)-2-(3S)-1-Azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl-2,3,3a,4,5,6-hexahydro-1H-benz[de]isoquinolin-1-one monohydrochloride酸帕洛諾司瓊135729-62-3
2-Methylbenzothiazole2-基并噻唑120-75-2
Boc-D-TyrosineBoc-D-酪氨酸70642-86-3
Neopentanediol dimethacrylate新二醇二基丙酸酯1985-51-9
3-Butoxypropanamine3-丁氧基丙胺16499-88-0
N,N-Bis[1(2)H-tetrazol-5-yl]amine雙5-氨基四氮唑127661-01-2
ISOVITEXIN異牧荊素29702-25-8
Bromophenol Blue溴酚藍(lán)115-39-9
2-Benzothienylboronic acid并噻吩-2-酸98437-23-1
Hexamethyldisiloxane六基二硅氧烷107-46-0
NA三化碳酸二脂絡(luò)合物
CARNOSOL鼠尾草酚5957-80-2
LIGHT GREEN SF YELLOWISH亮綠SF(淡黃)5141-20-8
Allyl phenyl ether丙基基1746-13-0
鹽酸四環(huán)素溶液 ,50mg/mL10mL
先鋒霉素溶液 ,100mg/mL1mL
131019-25無(wú)內(nèi)毒素螢火蟲(chóng)熒光素25mg
90905-1冰袋1個(gè)