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當前位置:首頁產品中心ATCC細胞腫瘤細胞Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541價格

Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541價格
產品簡介:

Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541價格售后:收到細胞后7天,如發現細胞有質量問題(如污染,死亡,快遞運輸等原因)時,應出具書面質量問題報告并及時傳真致銷售人員,我們將盡快為您解決。

產品型號:

更新時間:2025-10-23

廠商性質:經銷商

訪問量:447

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產品介紹

Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541價格質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產品全部經過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內,活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。 細胞到達客戶手中,1個月內出現任何問題,導致細胞在凍存前死亡,我們公司都可以免費再向客戶提供一次。

Cas9穩定表達的人前列腺癌細胞;DU145-Cas9-541價格操作步驟:

1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療
細胞名稱
形態特性  上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是采用慢病毒感染的方式使Du145細胞穩定表達Cas9-Flag-Neo,經400ug/mlG418篩選得到的單克隆,經Western Blotting驗證該克隆可以表達Cas9蛋白,可直接用Crispr技術編輯基因組DNA。 
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS;400ug/ml G418
傳代方法  1:4~1:6傳代;每周2~3次。
傳代情況 C3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR  Amelogenin:x,y;CSF1PO:10,11;D12S391:18,21;D13S317:12,14;D16S539:11,11;D18S51:12,12;D19S433:12,13;D21S11:30,31,33;D2S1338:16,16;D3S1358:16,16;D5S818:10,13;D6S1043:10,11;D7S820:7,10,11;D8S1179:13,14;FGA:22,22;Penta E:12,14;TH01:7,7;TPOX:11,11;vWA:17,18;
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

鏈親和素0.1mg
SalI1000U
CAS9024-52-6醛縮酶100mg
140592-1000PCNA 小鼠單抗1000 μL
80601-250非凍型細菌 RNA 保存液250mL
免 RNA 提取 RT-PCR 試劑盒 100 次
3-( 環己胺 )-1- 丙磺酸10g
間充質干細胞生長因子5mL
胰蛋白酶抑制劑,10mg/mL10mL
21-0160-5 角膜上皮細胞生長因子5mL
60401-250RNase-free 75% 乙醇250mL
PCR Mix 染料10mL
氨基磁珠2mL
大提柱式土壤 DNAout4次
Afu 尿嘧啶 -DNA 糖基化酶200U
CAS6131-99-3二甲基酸5gXANTHOSINE黃嘌呤核苷146-80-5
3-Mercapto-2-butanone3-巰基-2-丁40789-98-8
D-Histidine hydrochloride monohydrateD-組胺酸一水合物6341-24-8
1,2-Benzenedimethanol鄰二醇612-14-6
N,N-Bis(trifluoromethylsulfonyl)anilineN-基雙(三烷磺酰)亞胺37595-74-7
Phenylphosphinic acid基次膦酸1779-48-2
3,3,5-Trimethylcyclohexanone3,3,5-三基環己873-94-9
N-Fmoc-N'-trityl-D-glutamineN-Fmoc-N'-三基-D-谷氨酰胺200623-62-7
3-METHYL-1,3-BUTANEDIOL3-基-1,3-丁二醇2568-33-4
Tetraacetylethylenediamine四乙酰乙10543-57-4
3-Acetoxy-o-toluic acid2-基-3-乙酰氧基酸168899-58-9
2-METHYLNAPHTHO(2,1-D)OXAZOLE2-基萘并[2,1-D]惡唑20686-65-1
FMOC-Ala-OHN-芴氧羰基-L-丙氨酸35661-39-3
Selenium dioxide二氧化7446/8/4
2,2',5,5'-Tetrachlorobenzidine2,2',5,5'-四15721-02-5
Methyl 4-bromophenylacetate4-溴乙酸酯41841-16-1
GINSENOSIDE F3人參皂苷F362025-50-7
SIDURON環草隆1982-49-6
(S)-Oxiranemethanol(S)-縮水甘油60456-23-7
FMOC-MET-WANG RESINFMOC-MET-WANG RESIN
70602-100DNA 快速連接試劑盒100 次
一站式 MBP 標簽蛋白純化套裝20 次

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