人肝癌細胞；BEL-7405圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人肝癌細胞；BEL-7405圖片
形態特性  上皮細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性   
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN
凍存條件  *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

DNA 堿性膠上樣液 ,6×1.5mL
氣相 RNase 清除劑120mL
140657-25非變性蛋白分子量標準25mg
RNase-free EDTA 溶液 ,0.5M,pH 8.0100mL
動物細胞核蛋白微量制備試劑盒100 次
CAS3458-28-4D- 甘露糖5g
CAS7447-41-8氯化鋰 ( 無水 )100g
100601-50細胞核微量制備試劑盒50 次
土壤腐殖酸清除劑100mL
金黃色葡萄菌 V8 蛋白酶1mg
AFLP 試劑盒 (EcoRI-MseI)1600 次
80919-596 孔板 PCR 片段純化回收試劑盒 ( 離心法 )5次
HRP 標記內參抗體 (β-Tubulin)20μL
DNA 修復混合液 30 次
AH109 酵母菌種1mL人腺上細胞*培養基100mL
動力-硝酸鹽培養基/Motility-Nitrate Medium產氣莢膜梭菌的動力試驗250克國產/進口
大鼠腎小管平滑肌細胞*培養基100mL
亞硫酸鉍瓊脂/BS瓊脂/Bismuth Sulfite Agar用于食品中沙門氏菌的檢驗250克國產/進口
PANC-1(人胰腺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
P3X63Ag8(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×2
GH3(大鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠肝外膽管上細胞*培養基100mL
人前脂肪細胞*培養基100mL
TT(人甲狀腺導管細胞)5×106cells/瓶×2
HuTu-80(人十二脂腸腺)5×106cells/瓶×2
中分子量單一蛋白Marker（45 kD）50次國產
人腺導管細胞英文名稱：MDA-MB-435S
大鼠下脂肪細胞*培養基100mL
NCI-H446(人小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2gersion
Cell Counting Kit-8 (CCK-8試劑盒)規格：100次
PYG液體培養基基礎/PYG Broth Base雙岐桿菌增菌培養250克國產/進口
沙門氏志賀氏屬瓊脂培養基/SS瓊脂/Salmonella Shigella Agar沙門氏菌屬和志賀氏菌屬的分離培養250克國產/進口
U251(人膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2
小鼠畸胎瘤細胞英文名稱：Pcc4
人急性淋巴母細胞白血病細胞英文名稱：MT-4
U-2 OS, 人骨肉瘤細胞
LLC(小鼠肺細胞)5×106cells/瓶×2
克必隆 eTS PCR 法 cDNA 合成試劑盒10 次
12-145JM83 菌種1mL
綠如蘭核酸染料 ( 可見光型 )10mL
氯霉素溶液 ,25mg/mL10mL