人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人結直腸腺癌上皮細胞；DLD-1圖片
形態特性  上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性  DLD-1 是1977-1979年間D.L. Dexter和同事分離的兩株結直腸腺癌細胞株中的一株。 在ATCC和其它地方進行的DNA fingerprinting和染色體組型分析表明這株細胞與HCT-15 (CCL-225)相似，說明這兩者是來自同一個人的不同克隆。 他們的遺傳起源可通過DNA fingerprinting證實，但染色體組型分析顯示它們缺乏染色體標記*改變或數目上*改變。 細胞的CSAp陰性(CSAp-)。 DLD-1 細胞的 p53 抗原表達呈陽性(p53 抗原產生了一個C ->  
培養條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  優質胎牛血清，10%
傳代方法  消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件  *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR  Amelogenin:X,Y；CSF1PO:11,12；D13S317:8,11；D16S539:12,13；D18S51:11,17；D19S433:14,16；D21S11:29,32.2；D2S1338:17,25；D3S1358:17；D5S818:13；D7S820:10,12；D8S1179:15；FGA:22；TH01:7,9.3；TPOX:8,11；vWA:18,19
同工酶 
染色體 
使用權限 A類
細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

PVDF 膜，0.45μm，13×20cm1張
非變性法蛋白沉淀試劑盒10 次
CAS59-30-3葉酸5g
胰蛋白酶干粉50g
131085-10親和素10mg
抑制與產生超氧陰離子自由基測試盒 ( 比色法 )50 T
6- 羥基多巴胺5g
K802 菌種1mL
121112-10Stbl3 感受態細胞0.1 mL×10
Tricine-SDS-PAGE 配膠液1000mL
乳酸過氧化物酶10mg
DNA ，pH5.2，3M 100mL
柱式血清血漿 RNAout50 次
100829-30中 pH 緩沖液套裝30 次
RNase-free CTAB 溶液 ,20%100mL
RNA  GuSCN( 異硫氰酸胍 )100g
DNA  SDS( 十二烷基硫酸 )100g
CAS66-22-8尿嘧啶5g
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L- 賴氨酸鹽酸鹽25g
RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%100mLRaw264.7, 小鼠單核巨噬細胞白血病細胞gersion
H9c2(2-1) (大鼠心肌細胞)5×106cells/瓶×2
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Poly-D-lysine溶液規格：2mg
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緩沖李氏菌增菌肉湯基礎添加劑/Buffered Listeria Enrichment Broth Supplement加入225ml緩沖李氏菌增菌肉湯基礎中5毫升國產/進口
大鼠頜下腺上細胞*培養基100mL