小鼠雜交瘤細(xì)胞；DV2-M14價(jià)格質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。 細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。

小鼠雜交瘤細(xì)胞；DV2-M14價(jià)格操作步驟：

1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱
形態(tài)特性  淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 半貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 未定
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。

0.1mL×10    Rosetta(DE3) 感受態(tài)細(xì)胞    
48 T    超氧化物歧化酶測(cè)試盒    
100mL    RNase-free PVP K30 溶液 ,20%    
200mL    大鼠 NK 細(xì)胞分離液 1.068    
膽堿酯酶測(cè)試盒    18-0220-48    48 T
DNA  HEPES( 羥乙基乙硫磺酸 )    131018-100    100g
1mL    噻孢溶液 ,100mg/mL    
50 次    DNA 電泳分子量標(biāo)準(zhǔn) (3)λDNA/HindIII    
50mL    RNA 洗脫液    
1mL    Tuner(DE3) 菌種    
Tfl DNA 聚合酶    131037-100    100U
DNA PAGE 膠回收試劑盒    70908-100    100 次
5mL    髓核細(xì)胞生長(zhǎng)因子    
1mL    單細(xì)胞裂解液 (DNA)    
250mL    Western 印跡膜洗膜液    
1000μL    植物 Actin 小鼠單抗    
核酸外切酶 I    120410-750    750U
石蠟油，PCR     130841-10    10mL
5次    天凈沙非同位素探針雜交試劑盒    
10mL    EGTA 溶液 ,0.5mg/mL, 蛋白    
50 次    膜結(jié)合 DNA 清除試劑盒    
1袋    定影粉    
乙腈    CAS75-05-8    25mL
昆蟲種屬鑒定 PCR Mix    131128G-100    100 次
0.5g    X-Gal 干粉    
原卟啉原氧化酶(PPOX)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Protoporphyrinogen Oxidase (PPOX)
鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2B(GUCA2B)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Guanylate Cyclase Activator 2B (GUCA2B)
V-Yes-1 Yamaguchi肉瘤病毒相關(guān)基因同源物(LYN)單克隆抗體Monoclonal Antibody to V-Yes-1 Yamaguchi Sarcoma Viral Related Oncogene Homolog (LYN)
UDP葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶1家族多肽A1(UGT1A1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to UDP Glucuronosyltransferase 1 Family, Polypeptide A1 (UGT1A1)
腎瘤抗原(RAGE)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Renal Tumor Antigen (RAGE)
母系胚胎亮氨酸拉鏈蛋白激酶(MELK)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Maternal Embryonic Leucine Zipper Kinase (MELK)
甲型肝炎病毒細(xì)胞受體2(HAVCR2)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Hepatitis A Virus Cellular Receptor 2 (HAVCR2)
二-N-乙酰殼二糖酶(CTBS)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Di-N-Acetyl Chitobiase (CTBS)
α-甲基酰基輔酶A消旋酶(αMACR)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Alpha-Methylacyl Coenzyme A Racemase (aMACR)
正五聚蛋白3(PTX3)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Pentraxin 3, Long (PTX3)
EGF樣域蛋白7(EGFL7)單克隆抗體Monoclonal Antibody to EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)
Ras相關(guān)C3肉毒菌毒素底物1(Rac1)單克隆抗體Monoclonal Antibody to Ras Related C3 Botulinum Toxin Substrate 1 (Rac1)