雜交瘤細胞株；3H3F6圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 雜交瘤細胞株；3H3F6圖片
形態特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

PLEKHM3  血小板白細胞C激酶底物同源結構域M3抗體規格: 0.2ml
Zyxin/ESP 2  斑聯蛋白抗體規格: 0.2ml
Dynamin 2  酶動力蛋白2抗體規格: 0.1ml
APM2  脂肪特定轉錄因子2抗體規格: 0.2ml
VCAM-1/CD106/L1CAM  血管內皮細胞粘附分子抗體規格: 0.1ml
DDAH-II  雙甲基氨酸水解酶2抗體規格: 0.2ml
NEU4  神經氨酸酶4抗體規格: 0.2ml
TRP1/gp75  酪氨酸酶相關蛋白1抗體規格: 0.2ml
Cyclin F  周期素F抗體規格: 0.1ml
CEP152  中心體蛋白152抗體規格: 0.2ml
Phospho-Tie2 (Ser1119)  磷酸化血管生成素受體2抗體規格: 0.1ml
CREM  環磷酸腺苷反應元件調節蛋白抗體規格: 0.1ml
TP53TG5  p53靶蛋白5抗體規格: 0.2ml
Phospho-TAK1(Thr184)  磷酸化轉化生因子β活化激酶1規格: 0.1ml
AU5 tag  AU5 tag標簽抗體規格: 0.1ml
GTSE1/G2 and S phase expressed 1  G2期/S期應答相關蛋白1抗體規格: 0.2ml
phospho-Src(Tyr529)  磷酸化Src原基因抗體規格: 0.1ml
MARK2  絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶MARK2抗體規格: 0.2ml10 次        DNA 5’末端標記試劑盒
麥芽提取物    100g    CAS8002-48-0
脫氧膽酸    5g    131047-5
50 次        柱式拭子 DNAout
50 次        脈沖電泳 Marker( 酵母染色體 PFG)
1g        阿利新藍 8GX
250 次        細菌 RNAout
1mL        BL21 菌種
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 )    2000U    130856-2000
石蠟包埋組織全基因組擴增試劑盒    30 次    100940-30
1mL        微量單鏈 DNA 定量試劑盒
1g        HDAC 抑制劑
25mg        先鋒
250 mL        ECD-G 固定液
L- 纈氨酸    10g    CAS72-18-4
PRMI1640 培養基    100mL    19-0180-100
柱式凝固血液 DNAout    50 次    71204-50
100mL        去離子甲酰胺
10×100μL        DB3.1 感受態細胞
1次        96 孔板質粒 DNAout( 離心法 )
250U        核酸外切酶 T
6- 芐基氨基嘌呤    1g    CAS1214-39-7
LBA4404 農桿菌菌種    1mL    12-96
10 次        一管式點突變試劑盒