雜交瘤細胞株；1B3說明書【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 雜交瘤細胞株；1B3說明書
形態特性  淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性  該細胞屬專利保藏，其特征特性尚未公開。 
培養條件  MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法  1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況 C5
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR 
同工酶 
染色體 
使用權限 未定

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

Rabbit Anti-human IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的兔抗人IgG規格: 0.1ml
Phospho-HER2(Tyr1112)  磷酸化HER2受體抗體規格: 0.1ml
DVL2  蓬亂蛋白2抗體規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/PE  PE標記的兔抗羊IgG規格: 0.1ml
phospho-GSK3 Alpha/Beta(Tyr279+Tyr216)  磷酸化葡萄糖合成激酶3α/β抗體規格: 0.1ml
Salmonella enteritidis H  傷寒沙門氏菌鞭毛抗原H抗體規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bov IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗牛IgG 規格: 0.1ml
HBEX2/Bex1  腦組織表達X連鎖蛋白1抗體規格: 0.2ml
ELL  聚合酶延伸因子抗體規格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的小鼠抗牛IgG規格: 0.1ml
NFEM5/IRF4/MUM1  淋巴細胞特異性干擾素調節因子抗體規格: 0.2ml
HEBP2  Heme結合蛋白2抗體規格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的小鼠抗人IgM規格: 0.1ml
FRA2/FOSL2  FRA2/FOSL2抗體規格: 0.1ml
SRXN1  硫氧還蛋白1抗體規格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/AP  堿性磷酸酶（AP）標記的羊抗兔IgG規格: 0.1ml
FAS/Apo-1/CD95  載脂蛋白A1抗體規格: 0.1ml
FRMD4B  FRMD4B蛋白抗體規格: 0.2ml
Rabbit Anti-chicken IgG  兔抗雞IgG規格: 1mg
eIF3A  真核翻譯起始因子3A抗體規格: 0.1ml
beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉樣肽1-40(C端)抗體規格: 0.1ml
Melamine  三聚氰胺抗體規格: 0.2ml
Nadrin  神經細胞發育相關調控蛋白抗體規格: 0.2ml2000U        XhoI
天冬氨酸轉氨酶    500 U    CAS9000-97-9
HRP 標記內參抗體 (β-actin)    20μL    130592-20
動物 RNAout(TRIzol)     250mL    3070-250
50 次        膜結合 DNA 清除試劑盒
25 OD        3´-O-Me-m7G(5´)ppp(5´)G 帽結構類似物
5mL        角質細胞生長因子 - 不含 BPE
250mg        潮 B 干粉
卵巢上皮細胞生長因子    5mL    21-0210-5 
RNase-free Sarkosyl 溶液 ,10%    100mL    100890-100
1mL        PCR 抑制物清除劑
1個        暗盒 (5×7 英寸 )
1mg        H-89(PKA 抑制劑 )
10g        RNA  DTT ( 二硫代蘇糖醇 )
Insulin    18mg    23-0330-18
柱式糞便 DNAout    50 次    80102-50
100mL        RIPA 裂解液 ( 強 )
10 次        ConA 糖蛋白分離試劑盒
50 次        DNA 電泳分子量標準 (3)λ/EcoR I+ Hind III
100mL        MAL 指示劑培養基
熒光胺    25mg    CAS38183-12-9
親和層析柱    30 mL    140652-1
100 次        真菌種屬鑒定 PCR Mix 1
1g        鄰聯茴香胺
1g        2,6- 二氯酚靛酚
50mg        Cisplatin(DNA 交聯劑 / 細胞凋亡誘導劑 )