小鼠胚胎成纖維細胞；3T3-L1圖片【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞；3T3-L1圖片
形態特性  成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性  3T3-L1是從3T3細胞（Swiss albino）中經克隆分離得到的連續傳代的亞系。該細胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態經歷了前脂肪細胞到脂肪樣細胞的轉變。該細胞鼠痘病毒陰性；可產生甘油三酯，高濃度血清可增強細胞內脂肪堆積。 
培養條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 PN3
凍存條件  基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  -
同工酶 
染色體  68-72
使用權限 A類

細胞培養步驟：
一．培養基及培養凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優質胎牛血清，10%。
2、培養條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數換液方式，棄去半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
質量保證:    
我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。   細胞到達客戶手中，1個月內出現任何問題，導致細胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費再向客戶提供一次。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內，吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶，加入新鮮培養基，晃動細胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉移到無菌離心管內，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內，加入新鮮培養基，置37℃溫箱培養。

Rabbit Anti-human IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgG規格: 0.1ml
Hes5  發狀分裂相關增強子-5抗體規格: 0.2ml
HN1/ARM2  雄激素調節蛋白2抗體規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Goat IgG/RBITC  羅丹明標記的兔抗羊IgG規格: 0.3ml
GYG1  糖原蛋白1抗體規格: 0.2ml
MEPE  細胞外基質磷酸化抗體規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bovine IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗牛IgM規格: 0.1ml
GlyR alpha 1/2/3  甘氨酸受體alpha 1/2/3型抗體規格: 0.1ml
TET1/CXXC6  Ten-eleven轉運基因1蛋白抗體規格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標記的小鼠抗牛IgG規格: 0.1ml
phospho-GATA1(ser310)  磷酸化珠蛋白轉錄因子1抗體規格: 0.1ml
BRD1  BRD1蛋白抗體規格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/PE  PE標記的小鼠抗人IgM規格: 0.1ml
FoxP3  叉蛋白P3抗體規格: 0.1ml
TMEM147  跨膜蛋白147抗體規格: 0.2ml
Goat Anti-Chicken IgG/Cy7  Cy7標記的羊抗雞IgG規格: 0.1ml
APOC2  載脂蛋白C2抗體規格: 0.1ml
CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2  細胞粘附分子2規格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的羊抗小鼠IgG規格: 0.1ml
WASF1/WAVE 1  WAVE1蛋白抗體規格: 0.2ml100mL        RNase-free CTAB 溶液 ,20%
30 次        超快非醇核酸沉淀劑
50 次        真菌 RNAout
10mL        絲裂 C 溶液 ,5mg/mL
ATP 檢測試劑盒    200 次     18-0010-200
DNA 異硫氰酸胍溶液，5M    100mL    100902-100
1000U        SP6 RNA 聚合酶
10 次        DNA 5’末端標記試劑盒
1.5mL        酵母 tRNA 溶液 A( 粗提 )
1mL        JM101 菌種
p19siRNA 結合蛋白     1000U    130702-1000
0.5mL DNA 離心超濾管 (30-50 KD)    1個    120668B-1
15 次        絲狀真菌線粒體 DNAout
5次        大提柱式 DNA 清除劑
30 次        石蠟包埋組織 RNAout
5mL        AEBSF 溶液，10mg/mL
NdeI    400U    17-0150
顯影定影套裝    1套    130807-1
500mL        胎牛血清（北美特）