細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：
1.研究的對象是活細胞
在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。
3.研究的樣本可以達到比較均一性
通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備。

名稱    NCI-H2227 (小細胞肺癌細胞)
別稱 H2227; H-2227

年齡（性別） 男；54歲

組織來源 肺

生長特性 半貼半懸

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

背景描述 NCI-H2227細胞是于1989年8月從一名54歲白人男性小細胞肺癌皮膚轉(zhuǎn)移灶中分離得到的。

生物安全等級 1

生長培養(yǎng)基 DMEM/F12＋5μg/ml Insulin＋0.01mg/ml Transferrin＋30nM Sodium Selenite＋10nM Hydrocortisone＋10nM β-estradiol＋2mM L-glutamine＋5% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:2-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

保藏機構(gòu) ATCC; CRL-5934

使用方法：
收到細胞后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入*培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的*培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞*貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的*培養(yǎng)基。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

NAC( 抗氧化劑 )2g  AICAR(AMPK 激活劑 )5mg

Nicotinamide(Sirt1 抑制劑 )10g  AH109 酵母感受態(tài)細胞10×100μL

Nocodazole( 有絲分裂抑制劑 )5mg  AGL1 農(nóng)桿菌感受態(tài)細胞10×100μL

NS-2028(sGC 抑制劑 )1mg  AG490(JAK 抑制劑 )5mg

NS-398(COX-2 抑制劑 )1mg  AEBSF 溶液，10mg/mL5mL
FITC標記的整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣2蛋白抗體

FITC標記的整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶樣1蛋白抗體

FITC標記的整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶9型抗體

FITC標記的整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶8型抗體

FITC標記的整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶2型抗體
NCI-H2227 (小細胞肺癌細胞)大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素受體1(CRHR1)elisa檢測試劑盒

大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放激素受體2(CRHR2)elisa檢測試劑盒

大鼠促生長激素釋放激素(GHRH)elisa檢測試劑盒

大鼠促生長激素釋放激素(GRH)elisa檢測試劑盒

大鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)elisa檢測試劑盒
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