人凝血因子Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實驗方法     英文名稱：Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit      檢測方法：elisa酶聯免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗方法。其試劑穩定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質量問題，收貨后十五個工作日內包退換。 
英文名稱：Human coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA Kit 
規格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
人凝血因子Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實驗方法 實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
人凝血因子Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實驗方法 樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養上清：適用于檢測體外培養的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀，應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
人凝血因子Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實驗方法 操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數，把剩余的板條繼續冷藏處理。分別設標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請提前加入終止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產品本身以外的任何損失。
人凝血因子Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實驗方法 安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

Rabbit Anti-human IgM/Cy5  Cy5標記的兔抗人IgM規格: 0.1ml

IRS1  胰島素受體底物-1抗體規格: 0.2ml

phospho-IKKi/IKKe(Ser172)  磷酸化核因子NFκB抑制蛋白激酶i抗體規格: 0.1ml

TRPM6  瞬時受體電位離子通道蛋白6抗體（M亞家族）規格: 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG  兔抗豬IgG規格: 1mg

CNOT2  細胞表面趨化因子受體4相關蛋白2抗體規格: 0.2ml

Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3  PE-Cy3標記的兔抗人分泌型IgA規格: 0.1ml

phospho-FAK(Ser722)  磷酸化粘著斑激酶抗體規格: 0.1ml

GRASP65  高爾基體外周膜蛋白p65抗體規格: 0.2ml

PTN/Pleiotrophin  多效生因子抗體規格: 0.1ml

AGPHD1  氨基糖苷類磷酸結構域蛋白抗體規格: 0.2ml

ULBP2/N2DL2  UL16結合蛋白2抗體規格: 0.2ml

CD54/ICAM-1  細胞間粘附分子-1抗體規格: 0.1ml

SKALP/Elafin  彈性蛋白酶抑制劑抗體規格: 0.2ml

Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)  磷酸化細胞質膜微囊蛋白-1抗體規格: 0.1ml

A4GALT/CD77  α1,4-半糖基轉移酶1規格: 0.2ml

phospho-PFKL (Ser775)  磷酸化6磷酸果糖激酶抗體規格: 0.1ml

LCA5  致盲基因LCA5蛋白抗體規格: 0.2ml

Donkey Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的驢抗豚鼠IgG規格: 0.1ml

ATRIP/TREX1  系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體規格: 0.2ml

IMPDH1  肌苷單磷酸脫氫酶1抗體規格: 0.2ml

Phospho-Stathmin(Ser38)  磷酸化原基因蛋白18抗體規格: 0.1ml

LY-96/MD-2  MD-2蛋白抗體規格: 0.1ml

Phospho-MARCKS (Ser152/156)  磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體規格: 0.1ml

CO4A2  膠原蛋白4a2亞基抗體規格: 0.2ml小鼠腎上皮細胞*培養基100mL

皮革正青霉 Eupenicillium alutaceum

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

NCI-H2452(人間皮瘤細胞)5×106cells/瓶×2gersion

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小角狀節皮菌 Arthroderma corniculatum

小鼠腺上皮細胞*培養基100mL

大鼠皮膚肥大細胞*培養基100mL

銅綠假單胞菌 Pseudomnas aeruginose

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

MA-782(小鼠腺細胞)5×106cells/瓶×2

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

佛羅里達側耳 Pleurotus florida

小鼠肥大細胞細胞英文名稱：P815

人腦微血管內皮細胞*培養基100mL

熒光假單胞菌 Pseudomonas fluorescens

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

HL-60, 人早幼粒白血病細胞

中國臺灣根霉 Rhizopus formosensis

香菇 Lentinula edodes

人胰腺星狀細胞*培養基100mL

人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基100mL

人凝血因子Ⅷ相關抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒實驗方法釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

弗氏鏈霉菌 Streptomyces fradiae

FaDu(人咽鱗細胞)5×106cells/瓶×2

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

大豆慢生根瘤菌

人腺成纖維細胞*培養基100mL