DNA提取流程圖：

下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研

產(chǎn)品詳細(xì)介紹：

操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進(jìn)行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細(xì)胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細(xì)胞，每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml，用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定，不取決于細(xì)胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c．細(xì)胞懸液 離心收集細(xì)胞，每5-10×106動(dòng)物、植物、酵母細(xì)胞或1×107細(xì)菌細(xì)胞加入1ml TRIzol，反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細(xì)胞以免mRNA降解。一些酵母和細(xì)菌細(xì)胞需用勻漿儀處理。
2．將勻漿樣品在室溫（15-30℃）放置5分鐘，使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3．可選步驟：如樣品中含有較多蛋白質(zhì)，脂肪，多糖或胞外物質(zhì)（肌肉，植物結(jié)節(jié)部分等）可于2-8℃10000×g離心10分鐘，取上清。離心得到的沉淀中包括細(xì)胞外膜，多糖，高分子量DNA，上清中含有RNA。處理脂肪組織時(shí)，上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進(jìn)行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml，劇烈振蕩15秒，室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層：底層為黃色有機(jī)相，上層為無色水相和一個(gè)中間層。RNA主要在水相中，水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中，如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機(jī)相，進(jìn)一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙，室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘，離心前看不出RNA沉淀，離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
兔色素上皮衍生因子elisa試劑盒   兔色素上皮衍生因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   兔色素上皮衍生因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔色素上皮衍生因子試劑盒、兔色素上皮衍生因子 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒     5-Benzoylpentanoic acid  中文名：5-苯甲酰基戊酸  分子式：C12H14O3  度：98.0%

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISAKit     5-Azacytidine  320-67-2  中文名：5-氮胞苷  分子式：C8H12N4O5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

兔軟骨糖蛋白39(rabbit YKL-40)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     5-Chloro-2-nitrobenzoic acid  中文名：  分子式：C7H4ClNO4 

兔軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(rabbit COMP)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝  4-Hydroxythiobenzamide  中文名：  分子式：  度：98.0%
三環(huán)唑標(biāo)準(zhǔn)溶液(10μg/ml,u=2%)  Tricyclazol solution  質(zhì)量規(guī)格：10μg/ml,u=2% RatomeinELISAKit大鼠網(wǎng)膜素(omein)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

氟樂靈標(biāo)準(zhǔn)溶液(100μg/ml,u=3%)  Trifluralin solution  質(zhì)量規(guī)格：100μg/ml,u=3% FITC蛋白標(biāo)記試劑盒3(200微克/)

草達(dá)津(標(biāo)準(zhǔn)品)  Trietazine  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Mousesexhormone-bindingglobulin,SHBGELISA試劑盒小鼠性激素結(jié)合球蛋白(SHBG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

阿克泰(分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%)  Thiamethoxam  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,98% 小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA 試劑盒

三唑酮(分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.8%)  Triadimefon  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，99.8% Rat macrophage colony stimulating factor (M-CSF) ELISA Kit 大鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒

無水硫酸鈉(分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm)   sulfate anhydrous  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,pestizides≤1 ppm HumanMethemoglobin,MHBELISAKit 人高鐵血紅蛋白(MHB)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

甲嘧磺隆(標(biāo)準(zhǔn)品)  Sulfometuron-methyl  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Humanadrenomedullin,ADMELISA試劑盒人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

西草凈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,97%)  Simetryne  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,97% 植物NADPH氧化酶活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20(10樣本)

喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品,96%)  Quizalofop-ethyl  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品,96% MouseactivatedproteinC,APCELISAKit小鼠活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

精喹禾靈(分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%)  Quizalofop-p-ethyl  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品，98% 小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 ，英文名： sPECAM-1/sCD31 ELISA Kit
超級(jí)雜交液(Oligo探針)細(xì)胞PKCε激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

組織PKCδ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞PKCδ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

組織PKCγ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

細(xì)胞PKCγ激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C）

實(shí)驗(yàn)步驟
(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可！固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))