產品屬性：

產品名稱：NEL樣蛋白2(NELL2)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant NEL Like Protein 2 (NELL2)

NRP2; Nel-related protein 2; Protein kinase C-binding protein NELL2

型號：GOY-01D11

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：34.4kDa

實際分子量：34kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Pro64~Lys331 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：8.1

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。
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操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

δ氨基乙酰丙酸脫水酶抗體 ALAD

乙醇脫氫酶1抗體 AKR1A1

肌萎側索硬化癥相關蛋白4抗體 ALS2CR4

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磷酸化系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體 Phospho-ATRIP (Ser224)

系統性紅斑狼瘡相關蛋白TREX1抗體 TREX1

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解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

禾頂囊殼小麥變種 Gaeumannomyces graminis var. tritici

BGC823(人胃細胞)殺結核鏈霉菌 Streptomyces tubercidicus

串珠菌 Leuconostoc lactis人喉表皮細胞

人結腸細胞嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

橢孢青霉 Penicillium ellipsoideosporum玫瑰栗色鏈霉菌 Streptomyces rosecastaneus

爪哇根霉 Rhizopus javanicus

黑白輪枝孢

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

小單孢菌 Micromonospora sp.豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

大鼠腸動脈內皮細胞培養基泡盛曲霉變種 Aspergillus awamori var.

苜蓿中華根瘤菌杯形禿馬勃 Calvatia cyathiformis