蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白大鼠

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)

ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

型號：GOY-01D113

酶與激酶

感染免疫

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量：30.1kDa

實際分子量：30kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Ser31~Asn271 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Protein Kinase N2 (PKN2)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶N2(PKN2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase N2 (PKN2)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶N2(PKN2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 28 (MMP28)  產(chǎn)品名稱：基質(zhì)金屬28(MMP28)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Serpin A10 (SERPINA10)  產(chǎn)品名稱：抑制劑A10(SERPINA10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Serpin A10 (SERPINA10)  產(chǎn)品名稱：抑制劑A10(SERPINA10)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Serpin A10 (SERPINA10)  產(chǎn)品名稱：抑制劑A10(SERPINA10)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

磷酸化Bcl-2抗體 Phospho-Bcl-2 (Ser70)

磷酸化乳腺癌易感基因1抗體 Phospho-BAP1 (Ser592)

磷酸化Bcl-2抗體 Phospho-Bcl-2 (Thr56)

磷酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體 Phospho-Bcr (Tyr177)

細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 BIN3

雙向染色體細(xì)胞分裂蛋白1抗體 BOD1

轉(zhuǎn)錄因子Brn3蛋白抗體Brn3α BRN3A

骨形態(tài)發(fā)生蛋白6抗體 BMP6

骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體 BMP3

抑凋亡基因bag1抗體 Bag1

腦鈉素抗體 BNP

蛙皮素受體3抗體 Brs3

中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白大鼠豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaBNL CL.2(小鼠胚胎肝細(xì)胞)

CoC1(人卵巢細(xì)胞)酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp.lactis

根瘤菌酒假絲酵母 Candida kefyr

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum棒桿菌型

非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

PC-3M-IE8(人前列腺高轉(zhuǎn)移細(xì)胞株)大鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

戊糖桿菌 Lactobacillus pentosusNSC，大鼠神經(jīng)干細(xì)胞

人宮頸腸轉(zhuǎn)移細(xì)胞H9c2大鼠心肌細(xì)胞（ATCC來源）

人睪支持細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

棒桿菌 Corynebacterium sp.異常漢遜酵母 Hansenula anomala

小鼠黑色素瘤細(xì)胞苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

MLTC-1(小鼠睪間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

小鼠頜下腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基SF763(人腦瘤細(xì)胞)