產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱：內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Lipase, Endothelial (LIPG)

EL; EDL; Endothelial Lipase; Endothelial cell-derived lipase

型號(hào)：GOY-01D208

酶與激酶

代謝通路

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：30.5kDa

實(shí)際分子量：30kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ala175~Ile412 (Accession # Q9Y5X9) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Creatine Kinase B (CK-BB)  產(chǎn)品名稱：肌酸激酶B(CK-BB)重組蛋白物種：Canis familiaris; Canine (Dog，犬)

英文名稱：Recombinant Protein Kinase C Beta 1 (PKCb1)  產(chǎn)品名稱：蛋白激酶Cβ1(PKCb1)重組蛋白物種：Oryctolagus cuniculus (Rabbit，兔)

英文名稱：Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic III (NT5C3)  產(chǎn)品名稱：5'-核苷酸酶Ⅲ(NT5C3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Coagulation Factor V (F5)  產(chǎn)品名稱：Ⅴ(F5)重組蛋白物種：Sus scrofa; Porcine (Pig，豬)

英文名稱：Recombinant Otubain 1 (OTUB1)  產(chǎn)品名稱：卵巢腫瘤蛋白1(OTUB1)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Peptidase Inhibitor 16 (PI16)  產(chǎn)品名稱：肽酶抑制因子16(PI16)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

氧化酶5A抗體 COX5A

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框19抗體 C3orf19

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白60抗體 CCDC60

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白144A抗體 CCDC144A

周期素B3抗體 Cyclin B3

羧肽酶X(M14家族2)抗體 CPXM2

上皮鈣粘附分子結(jié)合蛋白E7 Ecadherin binding protein E7

周期素D結(jié)合蛋白1抗體 CCNDBP1

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白23抗體 CCDC23

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白89抗體 CCDC89

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白120抗體 CCDC120

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白30抗體 CCDC30

內(nèi)皮脂肪酶(LIPG)重組蛋白人解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

小鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基人前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicumECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)

鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosusHUVEC-12, 人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞系

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum異常漢遜酵母 Hansenula anomala

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii

丹參酮IIAU-2 OS, 人骨肉瘤細(xì)胞

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus蘇云金芽胞桿菌日本亞種 Bacillus thuringiensis subsp. japanensis

SF763(人腦瘤細(xì)胞)SW 780(人膀胱移行細(xì)胞)

無(wú)花果曲霉 Aspergillus ficuumMS1(小鼠胰島內(nèi)皮細(xì)胞)

COLO全細(xì)胞裂解液釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

黑綠木霉刺芹側(cè)耳 Pleurotus eryngii

CTLL-2(小鼠T細(xì)胞)根土壤桿菌 Agrobacterium tumefaciens