蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

產品名稱：基質金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白人

英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)

GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase

型號：GOY-01D220

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

心腦血管

肝膽病學

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌, 細胞外基質

預測分子量：21.7kDa

實際分子量：20kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Gly213~Ala399 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：5.6

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Interleukin 1 Receptor Associated Kinase 2 (IRAK2)  產品名稱：白介素1受體關聯激酶2(IRAK2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

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英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)  產品名稱：碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

凋亡加強結構域蛋白15抗體 CARD15

BCL10結合蛋白和激活核轉錄因子抗體 CARD10

慢性淋巴細胞白血病缺失基因6蛋白抗體 CLLD6

13號染色體開放閱讀框38抗體 C13orf38

14號染色體開放閱讀框140抗體 C14ORF140

陽離子轉運調節樣蛋白2抗體 CHAC2

15號染色體開放閱讀框62抗體 C15orf62

15號染色體開放閱讀框41抗體 C15orf41

鈣連蛋白抗體 CANX

二氫嘧啶酶相關蛋白2抗體 CRMP2

環核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體 CNGA2

細胞色素P450ⅡE1抗體 CYP2E1

基質金屬蛋白酶9(MMP9)重組蛋白人石蕊殺菌素鏈霉菌 Streptomyces litmocidini苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

酸球菌 Lactococcus lactis大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

MDA-MB-157(人腺細胞)Acc-2(人涎腺腺樣囊性細胞)

香菇 Lentinula edodes粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe

ME-180(人子宮頸表皮細胞)黑木耳 Auricularia auricula

龜裂鏈霉菌 Bacillus mucilaginosus大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纖維細胞)桿菌屬 Lactobacillus sp.

雙孢蘑菇 Agaricus bisporus苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti

青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis黑色素瘤

人骨髓間充質干細胞（hMSCs）A-375 [A375], 人惡性黑素瘤細胞株

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis銅綠假單胞菌 Pseudomnas Aeruginose

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii苜蓿中華根瘤菌

深紅正青霉 Eupenicillium rubidurum莫格球擬酵母 Torulopsis mogii