蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Toll Like Receptor 4 (TLR4)

CD284; TOLL; HToll

型號(hào)：GOY-01D315

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

肺臟病學(xué)

物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：-

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Serine/Threonine Kinase 39 (STK39)  產(chǎn)品名稱：/激酶39(STK39)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 10 (PSMD10)  產(chǎn)品名稱：非ATP酶體26S亞基10(PSMD10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)  產(chǎn)品名稱：耦合因子6(CF6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Coupling Factor 6 (CF6)  產(chǎn)品名稱：耦合因子6(CF6)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Aldehyde Oxidase 1 (AOX1)  產(chǎn)品名稱：乙醛氧化酶1(AOX1)重組蛋白物種：Bos taurus; Bovine (Cattle，牛)

英文名稱：Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)  產(chǎn)品名稱：鈉/鉀離子轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶β4肽(ATP1b4)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

聚合酶3抗體 CSGLCAT

β1/β-1,4-GalNAc-T抗體 CSGALNACT1

胎盤催乳素1/2抗體 Placental lactogen I+II

激酶C-SRC抗體 CSK

磷酸化激酶C-SRC抗體 phospho-CSK (Ser364)

酪蛋白激酶1/casein kinase Iα抗體 CSNK1A1L

半延伸蛋白α抗體 CSP

磺基轉(zhuǎn)移酶CSPS抗體 CSPS

軟骨酸性蛋白1抗體 CRTAC1

富含半蛋白結(jié)合蛋白抗體 CSRP2BP

富含半蛋白2抗體 CSRP2

CREB調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體 CRTC3

Toll樣受體4(TLR4)重組蛋白牛人腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

植物桿菌 Lactobacillus plantarum

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis人氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

木糖氧化產(chǎn)堿桿菌 Alcaligenes xylosoxidansEA.hy926(人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞)

酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis人胰島β細(xì)胞培養(yǎng)基

INS-1(大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

香菇 Lentinula edodes香菇 Lentinula edodes

嗜熱脂肪地芽孢桿菌 Geobacillus stearothermophilus

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes

K562/慢性髓性白血病細(xì)胞Stripping Buffer/蛋白印跡膜再生液

雙孢蘑菇MDA-MB-453(人腺細(xì)胞)

球毛殼 Chaetomium globosum熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae