蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Caspase 8 (CASP8)

CAP4; FLICE; MACH; MCH5; Cysteinyl Aspartate Specific Proteinases 8; Apoptotic cysteine protease; FADD-homologous ICE/ced-3-like protease; MORT1-associated ced-3 homolog

型號：GOY-01D349

信號轉導

酶與激酶

細胞凋亡

腫瘤免疫

神經科學

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：22.8kDa

實際分子量：25kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ser217~Asp384 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：6.0

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)  產品名稱：內皮素轉化酶1(ECE1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Thioredoxin Reductase 1 (TXNRD1)  產品名稱：硫氧還蛋白還原酶1(TXNRD1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

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英文名稱：Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase Kinase Kinase 1 (MAP3K1)  產品名稱：絲裂原激活蛋白激酶激酶激酶1(MAP3K1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

磷酸化原癌基因c-Jun抗體 phospho-c-Jun(Ser63)

9號染色體開放閱讀框116抗體 C9orf116

磷酸化CREB-1抗體 phospho-CREB-1(Ser133)

1號染色體開放閱讀框229抗體 C1orf229

殺菌肽/天蠶抗菌肽抗體 Cecropin

Cullin 4a蛋白抗體 Cullin 4A

細胞角蛋白3抗體 CK3

5號染色體開放閱讀框52抗體 C5orf52

緊密連接蛋白14抗體 Claudin 14

人巨細胞病毒單克隆抗體 CMV(1F11)

卷曲螺旋結構域蛋白85B抗體 CCDC85B

癌胚抗原抗體 CEA

胱天蛋白酶8(CASP8)重組蛋白人小鼠肝細胞珊瑚色諾卡氏菌 Nocardia coralline

T24, 人膀胱細胞白腐盾殼霉

巴氏梭菌 Clostridium pasteurianus豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

熱帶假絲酵母 Candida tropicalisCOLO 205(人結腸細胞)

短小芽胞桿菌 Bacillus pumilus尖孢鐮刀菌棉花專化型 Fusarium oxyporium f. sp. vasinfectum

異常畢赤酵母 Pichia anomala中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

HNE2, 人鼻咽細胞系人絨毛膜細胞

費氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii挪威假絲酵母 Candida norvegensis

WISH(人羊膜細胞)嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus人骨骼肌細胞培養基

Molt-4/急性淋巴母細胞白血病細胞阿舒假囊酵母 Crebrothecium ashbyii

根瘤菌 Rhizobium sp.豌豆根瘤菌 Rhizobium leguminosarum

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae蘇云金芽胞桿菌庫爾斯塔克亞種 Bacillus thuringiensis subsp. kurstaki