產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Group VII (LpPLA2)

PLA2G7; PAF-AH; PAFAH; Lp-PLA2; LDL-PLA2; Platelet Activating Factor Acetylhydrolase,Plasma; Phospholipase A2,Group VII; LDL-associated phospholipase A2; Phospholipase A2, Lipoprotein Associated

型號(hào)：GOY-01D354

酶與激酶

代謝通路

感染免疫

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌, 細(xì)胞外基質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：48.1kDa

實(shí)際分子量：48kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Phe22~Asn440 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：6.6

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 9 (CDK9)  產(chǎn)品名稱：周期素依賴性激酶9(CDK9)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Kynurenine-3-Monooxygenase (KMO)  產(chǎn)品名稱：犬尿-3-單加氧酶(KMO)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Bruton'S Tyrosine Kinase (Btk)  產(chǎn)品名稱：布魯東氏激酶(Btk)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Cytochrome C Oxidase Subunit IV Isoform 1 (COX4I1)  產(chǎn)品名稱：氧化酶亞基Ⅳ亞型1(COX4I1)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant UDP Glucose Ceramide Glucosyltransferase (UGCG)  產(chǎn)品名稱：UDP葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人), Mus musculus (Mouse，小鼠), Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Caspase 10 (CASP10)  產(chǎn)品名稱：胱天10(CASP10)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 CYLD

磷酸化巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體抗體 phospho-MCSF Receptor(Tyr923)

磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體 phospho-CYLD (Ser418)

磷酸化CBX5抗體 Phospho-CBX5 (Tyr37)

氯抗體 Chloramphenicol

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 phospho-c-Abl (Tyr89)

磷酸化細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體 Phospho-Caveolin-1 (Tyr14)

磷酸化周期素依賴激酶2抗體 Phospho-cdc2 (Thr161)

磷酸化周期素依賴性激酶2抗體 Phospho-CDK2 (Thr160)

細(xì)胞質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體 Caveolin-3

磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 Phospho-cdc25C (Thr48)

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體 C3Orf34

脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)重組蛋白小鼠蘇云金芽胞桿菌托馬諾夫亞種 Bacillus thuringiensis subsp. toumanoffii纖維素鏈霉菌 Streptomyces cellulose

Caco-2(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)Sf-9(昆蟲(chóng)細(xì)胞)

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

毛柄金錢菌(金針菇) Flammulina velutipes白地霉 Geotrichum candidum

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaNCI-H446(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)

Bacterial Protein Extraction Reagent/細(xì)菌蛋白抽提試劑 細(xì)胞名稱

繩狀青霉 Penicillium funiculosum釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

人肺細(xì)胞真核細(xì)胞膜蛋白抽提試劑（帶酶抑制劑）

人胰腺星狀細(xì)胞培養(yǎng)基RF/6A(猴視網(wǎng)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞)

葡萄球菌屬 Staphylococcus sp.小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 Yersinia enterocolitica

根瘤菌MDA-MB-231, 人腺細(xì)胞

麥角甾苷大鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞培養(yǎng)基

毛木耳 Auricularia polytricha植物桿菌 Lactobacillus plantarum