蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphoenolpyruvate Carboxykinase 1, Soluble (PCK1)

PEPCK1; PEPCKC; Cytosolic Phosphoenolpyruvate Carboxykinase; Phosphoenolpyruvate carboxykinase, cytosolic [GTP]

型號(hào)：GOY-01D376

酶與激酶

代謝通路

內(nèi)分泌學(xué)

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：31.9kDa

實(shí)際分子量：27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ile312~Ala563 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：7.8

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant Integrin Linked Kinase (ILK)  產(chǎn)品名稱：整合素連鎖激酶(ILK)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Adenylate Kinase 2 (AK2)  產(chǎn)品名稱：腺苷酸激酶2(AK2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Coenzyme Q6 Homolog, Monooxygenase (COQ6)  產(chǎn)品名稱：輔酶Q6同源物A(COQ6)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Glutathione S Transferase Mu 4 (GSTm4)  產(chǎn)品名稱：S轉(zhuǎn)移酶μ4(GSTm4)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Protein O-Mannosyltransferase 1 (POMT1)  產(chǎn)品名稱：蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶1(POMT1)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)  產(chǎn)品名稱：CD38分子(CD38)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

二肽基肽酶10抗體 DPP10

DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3L抗體 Dnmt3L

二肽氨基肽酶3抗體 DPP3

DNA復(fù)制相關(guān)元件結(jié)合因子抗體 DREF

B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白DRIL1抗體 DRIL1

轉(zhuǎn)錄共激活因子130抗體 DRIP130

核糖核酸酶3/Drosha抗體 Drosha

脫氧胸苷酸激酶DTYMK抗體 DTYMK

雙特異性蛋白磷酸酶5抗體 DUSP5

磷酸化酶動(dòng)力蛋白1抗體 phospho-Dynamin 1 (Ser774)

雙特異性蛋白磷酸酶10抗體 DUSP10

酶動(dòng)力蛋白1抗體 Dynamin 1

磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1(PCK1)重組蛋白COLO 320DM(人結(jié)直腸腺細(xì)胞)kasumi-1, 人白血病細(xì)胞株

栗色渾圓鏈霉菌 Streptomyces castaneoglobosus

發(fā)根根瘤菌 Rhizobium rhizogenes

小鼠Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))5×106cells/瓶×2

IM-9(人外周血B淋巴細(xì)胞)RA, 大鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞

膠韌革菌大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

靈芝 Ganoderma lucidium圓弧青霉 Penicillium cyclopium

苜蓿中華根瘤菌

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

大鼠神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

農(nóng)桿菌 Agrobacterium sp.假單胞菌 Pseudomonas sp.