蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 4 (CDK4)

CMM3; PSK-J3; Cell division protein kinase 4

型號：GOY-01D432

酶與激酶

腫瘤免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞質

預測分子量：33.5kDa

實際分子量：33kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Tyr6~Leu295 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.7

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

英文名稱：Recombinant Glucosidase Alpha, Neutral AB (GaNAB)  產品名稱：中性葡糖苷酶αAB(GaNAB)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Glycogen Debranching Enzyme (AGL)  產品名稱：糖原脫支酶(AGL)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 2, Branched (ACOX2)  產品名稱：?；趸?(ACOX2)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 2, Branched (ACOX2)  產品名稱：酰基氧化酶2(ACOX2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Acyl Coenzyme A Oxidase 3, Pristanoyl (ACOX3)  產品名稱：?；趸?(ACOX3)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Coenzyme A Synthase (COASY)  產品名稱：合酶(COASY)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

CD39樣蛋白1抗體 ENTPD2

磷酸化細胞外信號調節激酶5抗體 phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220)

真核翻譯起始因子5抗體 EIF5

早期B淋巴細胞因子2抗體 EBF2

ELAVL2蛋白抗體 ELAVL2

ELAVL2+ELAVL4蛋白抗體 ELAVL2 + ELAVL4

同源盒蛋白轉錄因子EN1抗體 Engrailed 1

轉錄因子ER81蛋白抗體 ER81

真核翻譯起始因子3K抗體 eIF3K

早期生長反應蛋白3抗體 EGR3

受體KA1抗體 EAA1

EMSY蛋白抗體 EMSY

周期素依賴性激酶4(CDK4)重組蛋白人大鼠小鼠雜合神經膠質瘤細胞英文名稱：NG108-15

轉鐵蛋白受體(TFR)天然蛋白 英文名稱：Native Transferrin Receptor (TFR)

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胰月示-亞鹽-環基礎(TSC) 規格： 100g 用途： 用于食品和臨床樣本中產氣莢膜梭菌的分離培養和計數(SN0177-92，ISO標準)。

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BT-474(人腺導管細胞)5×106cells/瓶×2

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再生蛋白1(NEO1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Neogenin 1 (NEO1)

NTM培養基/NTM Medium淋球菌的分離培養250克國產/進口

胃泌素(GT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Gastrin (GT)