產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Proteinase 3 (PR3)

MBN; PRTN3; ACPA; AGP7; C-ANCA; MBT; P29; PRK; Myeloblastin; Serine Proteinase,Neutrophil,Wegener Granulomatosis Autoantigen

型號(hào)：GOY-01D466

酶與激酶

感染免疫

自身免疫

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 分泌, 溶酶體

預(yù)測(cè)分子量：26.0kDa

實(shí)際分子量：27kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Ala24~Leu249 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：6.5

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品：

英文名稱：Recombinant N-Acetyltransferase 5 (NAT5)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰轉(zhuǎn)移酶5(NAT5)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Threonyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (TARS2)  產(chǎn)品名稱：蘇氨酰tRNA合成酶2(TARS2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant p21 Protein Activated Kinase 4 (PAK4)  產(chǎn)品名稱：p21蛋白激活激酶4(PAK4)重組蛋白物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

英文名稱：Recombinant Aspartyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (DARS2)  產(chǎn)品名稱：天冬氨酰tRNA合成酶2(DARS2)重組蛋白物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Glutamyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (EARS2)  產(chǎn)品名稱：谷氨酰tRNA合成酶2(EARS2)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

英文名稱：Recombinant N-Acetylglutamate Synthase (NAGS)  產(chǎn)品名稱：N-乙酰合酶(NAGS)重組蛋白物種：Homo sapiens (Human，人)

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

形成素2抗體（成蛋白） FMN2

FAM50B蛋白抗體 FAM50B

脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體 Flotillin 1

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子17抗體 FGF17

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23抗體 FGF23

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子20抗體 FGF20

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子19抗體 FGF19

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子22抗體 FGF22

叉頭蛋白L2抗體 FOXL2

叉頭相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子3抗體 FREAC3

胎球蛋白A Fetuin A

鐵蛋白抗體 Ferritin

蛋白酶3(PR3)重組蛋白小鼠糖發(fā)酵管BR20支國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

血紅素氧合酶2(HO2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Heme Oxygenase 2, Decycling (HO2)

小鼠破骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

小鼠結(jié)腸細(xì)胞英文名稱：CT-26 WT

角蛋白15(KRT15)重組蛋白英文名稱：Recombinant Keratin 15 (KRT15)

牛蛋白胨/肉蛋白胨/Beef PeptoneBR250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

SF126(人腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

白介素9(IL9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Interleukin 9 (IL9)

T1N1/ T1N1 Agar霍亂弧菌的培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

801-D (人巨細(xì)胞性肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠膀胱平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL