蛋白表達及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Calpain 10 (CAPN10)

Calcium-activated neutral proteinase 10

型號：GOY-01D1515

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：-

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素1(PCSK1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Proprotein Convertase Subtilisin/Kexin Type 1 (PCSK1)PC1, PC3, SPC3; NEC1; Prohormone Convertase 3; Prohormone Convertase 1; Neuroendocrine Convertase 1; Proprotein Convertase 1物種：Human，人

蛋腺苷轉(zhuǎn)移酶Ⅰα(MAT1a)重組蛋白英文名稱：Recombinant Methionine Adenosyltransferase I Alpha (MAT1a)MAT; SAMS; MATA1; SAMS1; AMS1; S-Adenosylmethionine Synthetase; S-adenosylmethionine synthase isoform type-1物種：Rat，大鼠

前列腺特異性膜抗原(PMSA)重組蛋白英文名稱：Recombinant Prostate-specific Membrane Antigen (PMSA)FOLH1; PSM; FGCP; FOLH; GCP2; NAALAD1; GCPII; mGCP; NAALADase I; Glutamate Carboxypeptidase II; Folate Hydrolase 1; Folylpoly-gamma-glutamate carboxypeptidase物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CD73抗體 CD73/NT5 0.2ml

酰基結(jié)合結(jié)構(gòu)域蛋白6抗體 ACBD6 0.2ml

G蛋白偶聯(lián)受體124抗體（腫瘤血管內(nèi)皮標記物） GPR124 0.2ml

磷酸化神經(jīng)上皮激酶抗體（乳腺癌激酶10） phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 0.1ml

骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體 Fast skeletal Myosin/MRLC2 0.1ml

腺苷A1受體抗體 ADORA1/Adenosine A1 Receptor 0.1ml

細胞生長抑制蛋白26抗體（前列腺特異性膜抗原樣蛋白） FOLH1B 0.2ml

白細胞介素-10抗體 IL-10 0.1ml

ARMER抗體 ARMER 0.2ml

O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗體 O-GlcNAc transferase 0.2ml

細胞毒顆粒相關(guān)蛋白TIA-1抗體 TIA1 0.2ml

細胞衰老相關(guān)蛋白1抗體 SEN1/ 0.2ml

鈣蛋白酶10(CAPN10)重組蛋白小鼠革蘭氏染色液試劑盒4×10ml盒

Lovastatin 75330-75-520mg

植物基因組50T盒

細胞過濾篩(不銹鋼)180目個

PVDF膜(0.22um) 13.25cm×15cm13.25×15張

Liriopesides B 山麥冬皂苷B182284-68-020mg

Ethidium Brmide 溴化乙錠 (EB)100mg支

Betulinaldehyde 白樺脂醛13159-28-920mg

Cutosine β-D- 阿糖胞苷50mg瓶

30%丙烯酰胺(29:1)100ml瓶

Artemisinin 素5g瓶

姬姆薩工作液100ml瓶

Sephadex G-25 medium 葡聚糖凝膠G-2525g瓶