蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Pyruvate Carboxylase (PC)

PCB

型號：GOY-01D1691

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：線粒體

預(yù)測分子量：53.6kDa

實際分子量：54kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Pro36~Glu486 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.2

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

轉(zhuǎn)甲狀腺素蛋白(PALB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Prealbumin (PALB)TBPA; PA; PLB; ATTR; TTR; Transthyretin; Prealbumin Amyloidosis Type I; Transports Thyroxine and Retinol物種：Human，人

端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Telomerase Reverse Transcriptase (TERT)EST2; TCS1; TP2; TRT; hEST2; Telomerase catalytic subunit; Telomerase-associated protein 2物種：Mouse，小鼠

甲硫氨酰tRNA合成酶(MARS)重組蛋白英文名稱：Recombinant Methionyl tRNA Synthetase (MARS)METRS; MTRNS; MetRS; Methionine tRNA Ligase 1,Cylasmic物種：Mouse，小鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

醛縮酶2抗體 ALDOB 0.1ml

鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶磷酸酶抗體 PPM1F 0.2ml

磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體 phospho-AMPK alpha 1(Thr172) 0.1ml

糖磷脂酰肌醇錨定蛋白137抗體 GPIP137 0.2ml

細(xì)胞周期G2/M期快速誘導(dǎo)蛋白SPDYA抗體 SPDYA 0.2ml

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體 CCDC25 0.2ml

cornichon樣蛋白抗體 CNIH3/CNIH2 0.2ml

FAM161B蛋白抗體 FAM161B 0.2ml

脫氫酶13抗體 RDH13 0.2ml

磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 c-ABL1/2(Tyr393/429) 0.1ml

神經(jīng)生長因子調(diào)控抑制蛋白抗體 ELL3 0.2ml

IQCG蛋白抗體 IQCG 0.2ml

丙酮酸羧化酶(PC)重組蛋白人四硫磺酸鈉煌綠增菌液基礎(chǔ)(TTB) 規(guī)格： 250g 用途： 用于沙門氏菌選擇性增菌培養(yǎng)（《中華人民共和國藥典》2010年版）。

Mtsb肉湯/改良胰蛋白胨大豆肉湯/改良胰酪胨大豆肉湯/改良大豆湯/Mtsb Broth With Novobiocin/Modified Tryptic Soy Broth大腸桿菌O157選擇性增菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口

小鼠樹突狀細(xì)胞肉瘤細(xì)胞英文名稱：DCS

小鼠肺細(xì)胞英文名稱：Lewis

SGC7901(人胃細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

Palatinose Hydrate 異麥芽酮糖-帕拉金糖100g瓶

Ginsenoside Rh2 人參皂苷Rh278214-33-220mg

SMMC-7721(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

基質(zhì)金屬15(MMP15)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 15 (MMP15)

改良MSRV培養(yǎng)基配套試劑 規(guī)格： 10支/盒 用途： 添加至改良MSRV培養(yǎng)基基礎(chǔ)(023025)中制成改良MSRV培養(yǎng)基

酚紅煌綠 規(guī)格： 250g 用途： 用于腸道菌的弱選擇性分離。

NZCYM肉湯/NZCYM BrothBR100克國產(chǎn)/進(jìn)口

Thrombin 1000u支