蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant DNA Methyltransferase 3B (DNMT3B)

ICF; M.HsaIIIB; DNA methyltransferase HsaIIIB

型號：GOY-01D1711

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核

預測分子量：46.7kDa

實際分子量：47&44&36kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Glu206~Pro355 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：9.4

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

周期素依賴性激酶2(CDK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 2 (CDK2)CDKN2; p33(CDK2); Cell division protein kinase 2; p33 protein kinase物種：Mouse，小鼠

同源域相互作用蛋白激酶2(HIPK2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Homeodomain Interacting Protein Kinase 2 (HIPK2)酶與激酶物種：Human，人

甘露糖苷酶α1A類成員1(MAN1A1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Mannosidase Alpha Class 1A Member 1 (MAN1A1)HUMM3; HUMM9; MAN9; Mannosyl-Oligosaccharide 1,2-Alpha-Mannosidase IA; Mannosidase alpha class 1A member 1; Processing alpha-1,2-mannosidase IA物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

磷酸化表皮生長因子受體抗體 Phospho-EGFR (Tyr998) 0.1ml

磷酸化絲裂原活化蛋白激酶1/2抗體 phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 0.1ml

FANCD2抗體 FANCD2 0.1ml

真核翻譯起始因子5抗體 EIF5 0.2ml

中介素抗體 ADM2 0.1ml

補體C3b-α鏈抗體 Complement C3b alpha' chain 0.1ml

β半乳糖苷酶抗體 Beta galactosidase 0.2ml

卵泡相關蛋白1 FSTL1/FRP 0.1ml

ras癌基因家族Rab5蛋白抗體 RAB5 0.1ml

甲狀腺激素受體共激活蛋白抗體 BRD8 0.2ml

磷酸化4E結合蛋白1抗體 phospho-eIF4EBP1(Thr36) 0.1ml

卵巢癌免疫反應抗原抗體 OCIAD2 0.2ml

DNA甲基轉移酶3B(DNMT3B)重組蛋白人雙料糖膽鹽胨水/雙料糖膽鹽培養基/Twofold Lactose Bile Salt Broth250克國產/進口

NCI-H838(人非小細胞肺細胞)5×106cells/瓶×2

結合蛋白4(RBP4)重組蛋白英文名稱：Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

酸桿菌培養基 規格： 250g 用途： 用于維生素檢測菌種的培養基

人腺上皮細胞培養基100mL

細菌粉/Bacto-AgarBR250克國產/進口

無菌豚鼠血清/Sterile Defidrinated Guinea pig BloodBR200毫升國產/進口

Bolton肉湯配套試劑 規格： 10支/盒 用途： 每支添加于100mL的 Bolton 肉湯基礎中

人小腸粘膜上皮細胞培養基100mL

彎菌血基礎/Campylobacter Blood Agar Base250克國產/進口

NCI-H295R(人腎上腺皮質腺細胞)5×106cells/瓶×2

神經束蛋白(NFASC)重組蛋白英文名稱：Recombinant Neurofascin (NFASC)

緩沖-甘油鈉溶液 規格： 250g 用途： 用于樣品的保存。（GB 4789.13-2010）