蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Legumain (LGMN)

AEP; LGMN1; PRSC1; Protease,Cysteine 1; Asparaginyl endopeptidase

型號：GOY-01D1966

酶與激酶

物種：Mus musculus (Mouse，小鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：溶酶體

預測分子量：51.3KDa

實際分子量：51kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Val18~Tyr435 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：5.9

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

核苷酸還原酶M1(RRM1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ribonucleotide Reductase M1 (RRM1)R1; RIR1; RR1; Ribonucleoside-diphosphate reductase large subunit物種：Mouse，小鼠

11-β-羥基類固醇脫氫酶3(HSD11b3)重組蛋白英文名稱：Recombinant 11-Beta-Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 3 (HSD11b3)HSD11b1L; SCDR10; HSD3; SDR26C2; 11-Beta Hydroxysteroid Dehydrogenase Type 1 Like Protein; Short chain dehydrogenase/reductase family 26C member 2物種：Human，人

羧酸酯酶3(CES3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carboxylesterase 3 (CES3)Br3; ES31; Brain carboxylesterase 3; Esterase 31; Liver carboxylesterase 31 homolog物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

發酵培養基 規格： 250g 用途： 用于鑒別發酵試驗(化妝品衛生規范微生物檢驗方法2007版)。

醋精氨加壓素 質量規格：純度98% Argipressin Acetate

 NEL樣蛋白2(NELL2)重組蛋白英文名稱：Recombinant NEL Like Protein 2 (NELL2)

 質量規格：純度大于98%,USPgrade Atenolol

 結合珠蛋白(Hpt)重組蛋白英文名稱：Recombinant Haptoglobin (Hpt)

鈣 質量規格：>98.5%,BR,可用于細胞培養 Atorvastatin calcium

 多巴受體D1(DRD1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Dopamine Receptor D1 (DRD1)

（標準品） 質量規格：含量測定,HPLC>99%,標準品 Atenolol

 糖原合酶激酶3α(GSK3α)重組蛋白英文名稱：Recombinant Glycogen Synthase Kinase 3 Alpha (GSK3a)

鈣(標準品) 質量規格：HPLC>98%,標準品 Atorvastatin calcium

 組織金屬抑制因子1(TIMP1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Tissue Inhibitors Of Metalloproteinase 1 (TIMP1)

阿扎胞苷/5-雜胞核苷(進分) 質量規格：> 98%,進分,Sigma A2385 Azacitidine (5-Azacytidine)

 NRK-52E(大鼠腎小管導管上皮細胞)5×106cells/瓶×2

5-胞苷/阿扎胞苷/5-雜胞核苷 質量規格：純度> 98%,BR，可用于細胞培養 Azacitidine (5-Azacytidine)

 HHCC(人肝細胞)5×106cells/瓶×2

5-胞苷/阿扎胞苷(標準品) 質量規格：HPLC>98%,標準品 Azacitidine (5-Azacytidine)

天冬酰胺內肽酶(LGMN)重組蛋白小鼠白淺灰鏈霉菌   產生新復合體。

滅酵母   用于釀造白葡萄酒

嗜水氣單胞菌   

康寧木霉   

繩狀青霉   可制雙鏈RNA

酵母   酒精酵母

大禿馬勃   食用，藥用止血

金龜子綠僵菌小孢變種   生物防治

固囊酵母   

糞鏈球菌   乳酸菌制劑

雪白根霉   產糖化酶

紅曲霉菌   

羅斯酵母