蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Proteasome 26S Subunit, Non ATPase 4 (PSMD4)

ASF; AF-1; AF; MCB1; Rpn10; S5A; pUB-R5; Antisecretory factor 1; Multiubiquitin chain-binding protein; 26S proteasome regulatory subunit RPN10

型號(hào)：GOY-01D2214

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測(cè)分子量：70.7kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Met1~Lys377 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

甲硫氨酰氨肽酶2(METAP2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Methionyl Aminopeptidase 2 (METAP2)MNPEP; p67; p67eIF2; Peptidase M; Initiation factor 2-associated 67 kDa glycoprotein物種：Human，人

超氧化物歧化酶1(SOD1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Superoxide Dismutase 1 (SOD1)ALS; ALS1; IPOA; Superoxide Dismutase 1, Soluble; Amyotrophic Lateral Sclerosis 1,Adult; Superoxide dismutase [Cu-Zn]物種：Horse，馬

前膠原賴-1,2-酮戊二酸-5-雙加氧酶1(PLOD1)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Procollagen Lysine-1,2-Oxoglutarate-5-Dioxygenase 1 (PLOD1)LLH; PLOD; LH1; Lysine Hydroxylase,Ehlers-Danlos Syndrome Type VI; Lysyl hydroxylase 1物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

293A，人胚腎上皮細(xì)胞系（腺病毒包裝級(jí)別）大鼠小鼠雜合神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞

脫氧膽鈉；去氧膽鈉 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Sodium deoxycholate

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

牛磺熊去氧膽 質(zhì)量規(guī)格：≥97% Tauroursodeoxycholic Acid Dihydrate

 胰(含100mL 酶解緩沖液)豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

新生鈉鹽 質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分 Novobiocin sodium

 巨大芽胞桿菌 Bacillus megaterium釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

牛磺熊去氧膽鈉 質(zhì)量規(guī)格：≥97% Tauroursodeoxycholic Acid Sodium Salt

 唾液桿菌水楊素亞種 Lactobacillus salivarius subsp. saliciniusIshikawa(人子宮內(nèi)膜細(xì)胞)

磺甲基(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,分析標(biāo)準(zhǔn)品 Sulfamerazine

 泛枝芽胞桿菌 Virgibacillus pantothenticus植物桿菌 Lactobacillus Plantarum

井岡 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Validamycin

 BSA標(biāo)準(zhǔn)梯度濃度試劑盒(即用型)-鼠IgG根瘤菌 Rhizobium sp.

腐草 質(zhì)量規(guī)格：≥97%,進(jìn)分 Phleomycin

 地衣芽孢桿菌 Bacillus licheniformis大鼠肝細(xì)胞

寡 質(zhì)量規(guī)格：>92%,進(jìn)分 Oligomycin, from Streptomyces

非ATP酶蛋白酶體26S亞基4(PSMD4)重組蛋白人雞肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

小鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫試劑盒

250mL TBE電泳液,10× TBE Buffer, 10× 常溫

大鼠脂蛋白脂(LPL)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

猴子類風(fēng)濕因子(RF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

人信號(hào)傳導(dǎo)子及轉(zhuǎn)錄激活子2(STAT2)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

500U 末端脫氧核苷轉(zhuǎn)移 Terminal Deoxynucleotidyl Transferase（TdT） -20℃保存

小鼠白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pEGFP-Actin pEGFP-Actin 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

MMO-MUG培養(yǎng)基  250g

2 ug pSilencer 2.0 pSilencer 2.0 低溫運(yùn)輸，-20℃保存