蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Phosphatidylinositol-4-Kinase Catalytic Alpha (PI4Ka)

PIK4CA; PI4K-ALPHA; pi4K230

型號(hào)：GOY-01D2248

酶與激酶

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞膜, 細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：64.1kDa

實(shí)際分子量：64kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Met1~Trp300 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

磷脂酶A2激活蛋白(PLAP)重組蛋白英文名稱：Recombinant Phospholipase A2 Activating Protein (PLAP)PLAA; PLA2P; PLA2-P; DOA1物種：Human，人

基質(zhì)金屬12(MMP12)重組蛋白英文名稱：Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)MME; HME; ME; Macrophage Metalloelastase; Macrophage Elastase物種：Rat，大鼠

基質(zhì)金屬9(MMP9)真核蛋白英文名稱：Eukaryotic Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

菜豆根瘤菌 Mesorhizobium phaseoli香菇 Lentinula edodes

普樂(lè)沙福,CXCR抑制劑 質(zhì)量規(guī)格：>99%,CXCR4趨化因子受體拮抗劑 Plerixafor,AMD3100

 Tissue Protein Extraction Kit/組織蛋白抽提試劑盒腺腺/耐藥株

A-779 質(zhì)量規(guī)格：>95%,BR (D-Ala7)-Angiotensin I/II (1-7);A779

 大豆慢生根瘤菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

二甲(標(biāo)準(zhǔn)品)) 質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品 Benzophenone

 球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis人卵巢成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基

甲(>99.0%(GC)) 質(zhì)量規(guī)格：>99.0%(GC),進(jìn)分 Benzophenone

 枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis節(jié)桿菌 Arthrobacter sp.

鹽哌侖西平 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR Pirenzepine dihydrochloride

 FRhK-4(恒河猴胚腎細(xì)胞)H9c2大鼠心肌細(xì)胞（ATCC來(lái)源）

醋磺米隆 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Mafenide Acetate

 球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

中間體I 質(zhì)量規(guī)格：>97% Bortezomib intermediates I

 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti葡枝根霉

蒎二酯 質(zhì)量規(guī)格：>97% BortezoMib Pinanediol Ester

磷脂酰肌醇-4-激酶α(PI4Ka)重組蛋白人10mg DAPI干粉 DAPI Powder -20℃干燥避光保存

兔子硫酸類肝素(HS)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

腦心浸出液肉湯（BHI）GB標(biāo)準(zhǔn) Brain Heart Influsion Broth 250g

大鼠神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

1 管 KM 71酵母菌 KM71 Yeast Strain -80℃保存

2 ug pEYFP-Golgi pEYFP-Golgi 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人皮質(zhì)抑素/穩(wěn)定蛋白(CORT)免疫試劑盒

2mL dCTP溶液，2.5mM dCTP Solution -20℃保存

兔子抗中性粒細(xì)胞顆粒抗體(ANGA)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大腸桿菌成套生化鑒定管  4種*4套

100mL 甲酰胺 Formamide     4℃保存