蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase IV (CA4)

CA-IV; CAIV; Car4; RP17; Retinitis Pigmentosa 17(Autosomal Dominant); Carbonate dehydratase IV

型號：GOY-01D2240

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：24.3kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Ser20~Ser220 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

饑餓素-O-乙酰基轉移酶(GOAT)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ghrelin-O-Acyltransferase (GOAT)OACT4; MBOAT4; Membrane Bound O-Acyltransferase Domain Containing Protein 4物種：Human，人

毒堿棕櫚酰基轉移酶2(CPT2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carnitine Palmitoyltransferase 2, Mitochondrial (CPT2)CPTASE; Carnitine O-Palmitoyltransferase 2; Carnitine palmitoyltransferase II物種：Human，人

鈉/鉀離子轉運ATP酶β4肽(ATP1b4)重組蛋白英文名稱：Recombinant ATPase, Na+/K+ Transporting Beta 4 Polypeptide (ATP1b4)X,K-ATPase subunit beta-m; X/potassium-transporting ATPase subunit beta-m物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

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角叉菜膠;卡拉膠 質量規格：BR Carrageenan

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十一 質量規格：>98% Zinc undecylenate

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普盧利;普利 質量規格：>99%,BR Prulifloxacin

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普盧利;普利(標準品) 質量規格：HPLC>98%,標準品 Prulifloxacin

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5-HIAA;5-羥基吲哚-3-乙(血清素代謝物) 質量規格：>98.0%,進分 5-HIAA

碳酸酐酶Ⅳ(CA4)重組蛋白大鼠人活化素A(ACV-A)免疫試劑盒

2 ug pENTR-GFP pENTR-GFP 低溫運輸，-20℃保存

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TPY瓊脂培養基 TPY Agar Medium 250g

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人氧化(COX)免疫試劑盒進口、組裝

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牛血清白蛋白(BSA)免疫試劑盒現貨供應

50T 乙型肝炎病毒cccDNA PCR測定試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

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