蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 10 (MAPK10)

JNK3; SAPK1b; PRKM10; Stress-activated protein kinase 1b; Stress-activated protein kinase JNK3; c-Jun N-terminal kinase 3; MAP kinase p49 3F12

型號(hào)：GOY-01D2084

酶與激酶

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：Cytoplasm. Membrane; Lipid-anchor. Nucleus. Mitochondrio

預(yù)測(cè)分子量：31.9kDa

實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Arg88~Ala332 (Accession # P53779) with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點(diǎn)：9.3

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

中性鞘磷脂酶(NSMASE)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Neutral Sphingomyelinase (NSMASE)SMPD2; N-SMase; ISC1; Neutral Sphingomyelin Phosphodiesterase; Sphingomyelin Phosphodiesterase 2,Neutral Membrane; Lyso-platelet-activating factor-phospholipase C物種：Rat，大鼠

CD38分子(CD38)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)cADPRH; ADPRC 1; c-ADPRH; T10; p45; 2'-phospho-ADP-ribosyl cyclase/2'-phospho-cyclic-ADP-ribose transferase; ADP-ribosyl cyclase 1物種：Mouse，小鼠

Ⅲ組磷脂酶A2(PLA2G3)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Phospholipase A2, Group III (PLA2G3)GIII-SPLA2; sPLA2-III; Group 3 secretory phospholipase A2; Group III secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 3物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

信號(hào)素5A(SEMA5A)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Semaphorin 5A (SEMA5A)

鈉(標(biāo)準(zhǔn)品) 質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定 Piperacillin Sodium

 Caov-3(人突狀卵巢腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

環(huán)吡司; 環(huán)吡 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP32,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) Ciclopirox Olamine

 NCI-H524(人非小細(xì)胞肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

西丁鈉 質(zhì)量規(guī)格：>90.1%,USP Cefoxitin sodium

 TSCCa(人舌鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

環(huán)吡司; 環(huán)吡（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ciclopirox Olamine

 前列腺英文名稱(chēng)：LNCaP

西丁鈉（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Cefoxitin sodium

 豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng)：PIEC

坦 質(zhì)量規(guī)格：>99%,USP30 Valsartan

 胰胨大豆胨固綠/胰蛋白胨大豆快綠/胰蛋白胨大豆固綠/Tryptic Soy Fast Green Agar濾膜細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和分離培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

沙坦（標(biāo)準(zhǔn)品） 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Valsartan

 平板計(jì)數(shù)/PCA食品細(xì)菌總數(shù)測(cè)定和平板計(jì)數(shù)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

  質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR Glipizide

絲裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重組蛋白人大鼠抵抗素樣α(Retnla)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

50次 細(xì)菌膜蛋白質(zhì)微量提取試劑盒 Bacterial Membrane Protein Miniprep Kit 4℃保存、DNase I需低溫保存

雞腎上腺素(EPI)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒

50次 柱式土壤RNAout Column Soil RNAOUT 4℃保存

素B（2.5萬(wàn)單位） Polymyxin B 2.5萬(wàn)單位/支*5

犬骨橋素(OPN)免疫試劑盒

大鼠纖維蛋白原α鏈(Fga)免疫試劑盒

鴨抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠胃泌素(Gastrin)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

山羊孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝