蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Purine Nucleoside Phosphorylase (PNP)

NP; PUNP; Nucleoside Phosphorylase; Inosine phosphorylase; Inosine-guanosine phosphorylase

型號：GOY-01D2366

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：n/a

預測分子量：36.0kDa

實際分子量：-(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Asn289 with

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：-

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

烯醇化酶(ENO3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Enolase 3 (ENO3)MSE; Beta Enolase; Enolase 3; 2-phospho-D-glycerate hydro-lyase; Skeletal muscle enolase物種：Human，人

基質金屬9(MMP9)活性蛋白英文名稱：Active Matrix Metalloproteinase 9 (MMP9)GELB; Gelatinase B; CLG4B; CLG4-B; 92 KDa Gelatinase; 92kDa Type IV Collagenase物種：Human，人

花生四烯酸-5-脂加氧酶(5-LO)重組蛋白英文名稱：Recombinant 5-Lipoxygenase (5-LO)LOX5; 5-LOX; ALOX-5; ALOX5; 5LPG; LOG5; Lipoxygenase 5物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

貝葉多孔菌釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

去氫鉤藤堿（標準品） 質量規格：HPLC≥98%，標準品 Corynoxeine

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人參皂苷F2(標準品) 質量規格：HPLC≥98%，標準品 Ginsenoside F2

嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)重組蛋白大鼠小鼠5羥基乙酸(5-HIAA)免疫試劑盒現貨供應

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25g 十六烷基基 CTAB(Cetyltrimethylammonium Bromide) 室溫干燥保存

10g 1,4- 二乙磺酸 1,4-Piperazinediethane Sulfonic Acid  (PIPES) 室溫干燥保存

兔子髓過氧化物(MPO)免疫試劑盒進口、組裝

100mL MOPS Buffer,0.5M,pH7.0   MOPS Buffer,0.5M,pH7.0   常溫保存

20µL 兔抗GST標簽多抗 Anti GST-Tag Rabbit PAb -20℃保存

250mL Glycine Buffer（緩沖液）,0.2M,pH3.0   Glycine Buffer,0.2M,pH3.0   常溫保存

豬甲狀腺素(T4)免疫試劑盒

豬單核細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)免疫試劑盒

2 ug pPIC 9K pPIC 9K 低溫運輸，-20℃保存