蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Phospholipase A2, Group III (PLA2G3)

GIII-SPLA2; sPLA2-III; Group 3 secretory phospholipase A2; Group III secretory phospholipase A2; Phosphatidylcholine 2-acylhydrolase 3

型號：GOY-01D2465

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：31.4kDa

實際分子量：31kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Gly20~Leu268 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：100mM NaHCO3, 500mM NaCl緩沖液（pH8.3,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：6.4

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

芳基酯酶F(ARSF)活性蛋白英文名稱：Active Arylsulfatase F (ARSF)ASF物種：Human，人

法尼基二磷酸法尼基轉移酶1(FDFT1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Farnesyl Diphosphate Farnesyltransferase 1 (FDFT1)SQS; SS; Squalene Synthase; FPP farnesyltransferase物種：Human，人

外核苷酸焦磷酸酶/磷酸二酯酶1(ENPP1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Ectonucleotide Pyrophosphatase/Phosphodiesterase 1 (ENPP1)M6S1; NPP1; NPPS; PC-1; PCA1; PDNP1; Membrane component chromosome 6 surface marker 1; Alkaline phosphodiesterase I; Plasma-cell membrane glycoprotein PC-1物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

三葉草根瘤菌 Rhizobium trifolii酒假絲酵母 Candida kefyr

棓酯（標準品） 質量規格：含量測定 Propyl gallate

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美扎（標準品） 質量規格：UV法溶出度檢查 Chlormezanone

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布芬（標準品） 質量規格：含量測定 Fenbufen

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人鋅指蛋白RIZ(PRDM2)免疫試劑盒

培養基Q Medium Q (Columbia agar) 250g

30次 DNA PAGE膠回收試劑盒 PAGE DNABACK 4℃保存

50T 紅薯內源基因PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存

2 ug pMXmKate(650) pMXmKate(650) 低溫運輸，-20℃保存

大鼠血管生成素2(ANG-2)免疫試劑盒進口、組裝

大鼠抗抗體(AsAb)免疫試劑盒現貨供應

人魚1(PRM1)免疫試劑盒現貨供應

PPLO肉湯 PPLO Broth 250g

1瓶 CW-2細胞株 CW-2 低溫運輸和保存