蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告?？砂纯蛻?hù)要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱(chēng)：Recombinant Cathepsin W (CTSW)

CTS-W; LYPN; Lymphopain

型號(hào)：GOY-01D2581

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：66.9kDa

實(shí)際分子量：70kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Asp22~Pro371 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：9.1

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

β-1,3-葡糖醛酸基移酶3(b3GAT3)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Beta-1,3-Glucuronyltransferase 3 (b3GAT3)GLCATI; GlcAT-I; Glucuronosyltransferase I; Galactosylgalactosylxylosylprotein 3-Beta-Glucuronosyltransferase 3; UDP-GlcUA:Gal beta-1,3-Gal-R glucuronyltransferase物種：Human，人

麥芽糖酶糖化酶(MGAM)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Maltase-glucoamylase (MGAM)MGA; Glucan 1,4-Alpha-Glucosidase物種：Human，人

泛素結(jié)合酶E2C(UBE2C)重組蛋白英文名稱(chēng)：Recombinant Ubiquitin Conjugating Enzyme E2C (UBE2C)UBCH10; Ubiquitin carrier protein C; Ubiquitin-protein ligase C物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

果香地霉 Colletotrichum musae球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis

基紅(>80%,Ind Grade) 質(zhì)量規(guī)格：>80%,Ind Grade Propyl red

 球孢鏈霉菌 Streptomyces globisporus雙孢蘑菇

吡唑(>98%，BR) 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR Pyrazole

 消化桿菌 Lactobacillus alimentarius人前列腺平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

奎寧(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BC Quinine

 大鼠角膜內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

焦(>45%，BR) 質(zhì)量規(guī)格：>45%，BR Pyrophosphoric acid

 香菇 Lentinula edodes釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

土耳其紅油 質(zhì)量規(guī)格：BR Red oil

 293A，人胚腎上皮細(xì)胞系（腺病毒包裝級(jí)別）豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

倒千里光堿 質(zhì)量規(guī)格：>90%,進(jìn)分 Retrorsine

 天藍(lán)色鏈霉菌 Streptomyces coelicolorVero(非洲綠猴腎細(xì)胞)

羅丹明B基(>97%,BS) 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BS Rhodamine B base

 苜蓿中華根瘤菌炭黑曲霉 Aspergillus carbonarius

羅丹寧(>98%,Ind Grade) 質(zhì)量規(guī)格：>98%,Ind Grade Rhodanine

組織蛋白酶W(CTSW)重組蛋白大鼠50次 柱式土壤DNAout Column Soil DNAOUT 常溫

面包酵母標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基  250g

2 ug pEXP-Lib pEXP-Lib 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

犬肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

人精(Arg)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

1瓶 UMNSAH/DF-1細(xì)胞株 UMNSAH/DF-1 低溫運(yùn)輸和保存

5g 乙酸－ 1 －萘脂 1-Naphthyl Acetate 室溫保存

2 ug pGADT7Rec pGADT7Rec 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

人鋅轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(ZnT4)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體3(VEGFR-3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

2 ug pYIP5 pYIP5 低溫運(yùn)輸，-20℃保存