蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告?？砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶撕灒?/span>Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Deoxyribonuclease II Beta (DNASEIIb)

DNase-IIb; DNase2b; DNase2-b; DLAD; DNASE2-Like Acid DNase; Endonuclease DLAD

型號：GOY-01D2608

酶與激酶

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：分泌

預測分子量：68.3kDa

實際分子量：68kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Thr23~Asn356 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點：9.3

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

解整合素金屬8(ADAM8)重組蛋白英文名稱：Recombinant A Disintegrin And Metalloprotease 8 (ADAM8)CD156-A; MS2; CD156a; Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 8物種：Mouse，小鼠

N-乙酰半乳糖胺酶α(NAGa)重組蛋白英文名稱：Recombinant N-Acetylgalactosaminidase Alpha (NAGa)Alpha-N-Acetylgalactosaminidase; Alpha-galactosidase B物種：Mouse，小鼠

補體成分9(C9)重組蛋白英文名稱：Recombinant Complement Component 9 (C9)酶與激酶物種：Rabbit，兔

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞)無花果曲霉 Aspergillus ficuum

2,7-二-9,9-二正辛基芴(>98.0%(HPLC)) 質量規格：>98.0%(HPLC) 2,7-Dibromo-9,9-di-n-octylfluorene

 新月彎孢霉 Curvularia lunata根瘤菌

2,5-二噻唑(>97.0%(GC)) 質量規格：>97.0%(GC) 2,5-Dibromothiazole

 考馬斯亮藍R-250釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

2,6-二萘(>98.0%(GC)) 質量規格：>98.0%(GC) 2,6-Dibromonaphthalene

 人參刺盤孢 Colletotrichum panacicolaSNU-5(人胃細胞)

2,5-二硒酚(>98.0%(GC)) 質量規格：>98.0%(GC) 2,5-Dibromoselenophene

 mCF, 小鼠心臟成纖維細胞大鼠腦動脈血管平滑肌細胞培養基

1,3-二-7-叔丁基芘(>97.0%(GC)) 質量規格：>97.0%(GC) 1,3-Dibromo-7-tert-butylpyrene

 野生鏈球菌 Streptococcus ferus芽孢桿菌 Bacillus laevolacticus

6,12-二屈(>98.0%(HPLC)) 質量規格：>98.0%(HPLC) 6,12-Dibromochrysene

 豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

9,9-二甲基-9H-9-硅芴(>98.0%(GC)) 質量規格：>98.0%(GC) 9,9-Dimethyl-9H-9-silafluorene

 IR983F(大鼠骨髓瘤細胞)MCF-7(人腺細胞)

2,7-二菲-9,10-二(>97.0%(GC)) 質量規格：>97.0%(GC) 2,7-Dibromophenanthrene-9,10-dione

脫氧核糖核酸酶Ⅱβ(DNASEIIb)重組蛋白大鼠小鼠白介素10(IL-10)免疫試劑盒進口、分裝

1瓶 NCI-H520細胞株 NCI-H520 低溫運輸和保存

山羊甘肽還原(GSR)免疫試劑盒

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250mL Sodium Chloride Solution（氯化鈉溶液），0.9%   Sodium Chloride Solution，0.9%   常溫保存

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小鼠酸性成纖維細胞生長因子(aFGF/FGF-1)免疫試劑盒進口、組裝

人細胞膜DNA抗體(cmDNA)免疫試劑盒進口、組裝

1瓶 LNcap cloneFGC（GFP）細胞株 LNcap cloneFGC（GFP） 低溫運輸和保存

MEM維持液 MEM maintenance of fluid 36支/盒