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當前位置:首頁產品中心科研細胞原代細胞上海谷研人牙髓干細胞

人牙髓干細胞
產品簡介:

公司有人牙髓干細胞其它各種產品:人CC趨化因子受體5(CCR5)elisa檢測試劑盒免費代測人CC趨化因子受體2(CCR2)elisa檢測試劑盒人CC趨化因子受體1(CCR1)elisa檢測試劑盒

產品型號:上海谷研

更新時間:2025-11-13

廠商性質:經銷商

訪問量:234

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產品介紹
  組織來源:牙髓組織
 
  產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
 
  細胞簡介:
 
  人牙髓干細胞分離自滑膜組織;牙髓組織位于牙齒內部的牙髓腔內。牙髓腔的外形與牙體形態大致相似,牙冠部髓腔較大,稱髓室,牙根部髓腔較細小,稱根管,根尖部有小孔,稱根尖孔。牙髓組織主要包含神經、血管,淋巴和結締組織,還有排列在牙髓外周的造牙本質細胞,其作用是造牙本質。牙髓因受到病源刺激物的作用不同以及機體抵抗力的差異,出現不同的病理變化,在臨床上會表現為一系列不同的癥狀和體征。牙髓充血狀況持續時間較長后,轉化為急性牙髓炎癥。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強的自我復制和多向分化潛能,具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。
 
  方法簡介:
 
  公司實驗室分離的采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
 
  質量檢測:
 
  公司實驗室分離的經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
 
  培養信息:
 
  培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
 
  換液頻率:每2-3天換液一次
 
  生長特性:貼壁
 
  細胞形態:成纖維細胞樣
 
  傳代特性:可傳3-5代左右
 
  消化液:0.25%
 
  培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
 
牙髓干細胞
  冷凍保存細胞之方法?
 
  冷凍保存方法一:冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30分鐘*) → -80 ℃16~18小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase長期儲存。
 
  冷凍保存方法二:冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。-20 ℃不可超過1小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
 
  培養操作:
 
  1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入 10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
 
  2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
 
  1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
 
  2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
 
  3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
 
  4. 將細胞懸液按1:2比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
 
  3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25瓶為類;
 
  1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗一遍后加入1ml ,細胞變圓脫落后,加入1ml含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
 
  2. 4min 1000rpm離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞,根據細胞數量加入血清和DMSO,輕輕混勻,DMSO終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存1ml細胞懸液,注意凍存管做好標識。
 
  3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
 
  實驗報告:
 
  產品僅用于科研:
 
  一、分離與培養:
 
  1、無菌條件下,取出1-3d齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,后將成1mm3左右大?。?br /> 
  2、往組織塊中加入4mL酶消化液(0.1%和0.1%I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10?S培養基終止消化后4℃放置;
 
  3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
 
  4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10?S DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2培養箱中培養;
 
  5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養。
 
  二、免疫熒光鑒定:
 
  1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
 
  2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
 
  3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4%BSA封閉細胞30min;
 
  4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
 
  5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,37℃條件下放置1h;
 
  6、用PBS沖洗3次,每次10min,后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
 
  血管緊張素Ⅱ抗體
 
  血管緊張素Ⅱ受體1抗體
 
  血管生成素-1抗體
 
  血管生成素樣蛋白2抗體
 
  人CC趨化因子受體5(CCR5)elisa檢測試劑盒免費代測
 
  人CC趨化因子受體2(CCR2)elisa檢測試劑盒
 
  人CC趨化因子受體1(CCR1)elisa檢測試劑盒
 
  人CC趨化因子7 (CCL7/MCP3/SCYA6/SCYA7)elisa檢測試劑盒
 
  人CC趨化因子5(CCL5/D17S136E/SCYA5)elisa檢測試劑盒免費代測
 
  小鼠白介素17A(IL-17A)elisa檢測試劑盒
 
  小鼠白介素17B(IL17B)elisa檢測試劑盒
 
  小鼠白介素17C(IL17C)elisa檢測試劑盒
 
  小鼠白介素17F(IL17F)elisa檢測試劑盒
 
 
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