人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌)；NCI-H460圖片【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細(xì)胞名稱 人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌)；NCI-H460圖片
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  該細(xì)胞p53 mRNA陽性，致瘤性陽性。 
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法  1:3~1:8，每周換液2次
傳代情況 P18
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR 
同工酶 
染色體 
使用權(quán)限 A類
人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌)；NCI-H460圖片細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理：
1、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌)；NCI-H460圖片質(zhì)量保證:    
我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存，凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測(cè)，100%進(jìn)口來源，100%保證5代以內(nèi)，活力>95%，無細(xì)菌、真菌、支原體污染。   細(xì)胞到達(dá)客戶手中，1個(gè)月內(nèi)出現(xiàn)任何問題，導(dǎo)致細(xì)胞在凍存前死亡，我們公司都可以免費(fèi)再向客戶提供一次。
人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌)；NCI-H460圖片操作步驟：
1）貼壁細(xì)胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi)，吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細(xì)胞，加入適量胰酶，使胰酶的量能蓋住細(xì)胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去胰酶，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動(dòng)細(xì)胞瓶，終止胰酶作用，用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2）懸浮細(xì)胞傳代：將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細(xì)胞懸液，將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。

SDS-PAGE 電泳液 ( 干粉 )5L
Okadaic acid 鹽 (PP1 和 PP2A 抑制劑 )10μg
凝血酶1000U
T4 RNA 連接酶1000U
51208B-5dNTP 溶液 ,10mM5mL
膠原酶Ⅰ型100mg
卵巢上皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子5mL
CAS7240-90-65- 溴 -4- 氯 -3- 吲哚 -β-D- 半乳糖苷100mg
CAS8002-43-5卵磷脂 ( 蛋黃 )10g
90613-25動(dòng)物細(xì)胞核蛋白微量制備試劑盒25 次
尿苷 -5'- 二磷酸25mg
柱式糞便 DNAout50 次
CAS9007-34-5膠原蛋白Ⅰ型1g
柱式藻類 RNAout50 次
糞便 DNAout100 次
DNA 稀釋液10mLHEL(人紅白細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
5%糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
硫檸膽蔗瓊脂培養(yǎng)基/TCBS瓊脂/TCBS Agar用于霍亂、副溶弧菌的分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
LLC-WRC 256(大鼠腹水細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中性蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL
胎兒真成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MKTTN肉湯/MKTTN Broth食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌250克國產(chǎn)/進(jìn)口
人成骨肉瘤細(xì)胞英文名稱：MG-63
葡萄糖銨發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進(jìn)口
SuperPolymer Rabbit&Mouse HRP Kit/Super Polymer-二步法IHC試劑盒3ml、18ml國產(chǎn)
Calu-6(人肺退行性細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
Jurkat全細(xì)胞裂解液100μg國產(chǎn)
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞gersion
改良CAMP-BAP氏瓊脂基礎(chǔ)/改良CAMP-BAP氏培養(yǎng)基基礎(chǔ)/CAMP-BAP Agar Base Modified彎曲桿菌選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
S180/小鼠腹水瘤株國產(chǎn)
Hela S3(人宮頸細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
4-甲基傘形酮葡糖苷酸培養(yǎng)基(配套靛基質(zhì))/MUG培養(yǎng)基/MUG-Medium（with Kovacs）大腸埃希氏菌快速熒光測(cè)定培養(yǎng)基20g+靛基質(zhì)20m國產(chǎn)/進(jìn)口
亮綠糖培養(yǎng)基/Brilliant Green Lactose Medium飲用天然礦泉水中大腸桿菌檢驗(yàn)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
MCF 7B(人腺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人肺癌細(xì)胞(大細(xì)胞肺癌)；NCI-H460圖片中性紅染色液(活細(xì)胞染色用)規(guī)格：100ml
聚乙二醇 8000250g
CAS76-05-1三氟100mL
130951-10Southern 細(xì)菌 (G+)DNAout10 次
EcoRV1500U
山羊抗小鼠 IgG(H+L)，辣根過氧化物酶標(biāo)記100μL