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產品中心

當前位置:首頁產品中心分子生物學試劑探針標記及檢測10mL超級雜交液(原位雜交)

超級雜交液(原位雜交)
產品簡介:

超級雜交液(原位雜交)公司正*的各種產品血液結構型神經元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測試劑盒
體液結構型神經元一氧化氮合成酶(cNOS/NOS1/nNOS)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性比色法定量檢測試劑盒
組織誘導型巨噬細胞一氧化氮合成酶((iNOS /NOS2/mNOS))活性比色法定量檢測試

產品型號:10mL

更新時間:2025-10-31

廠商性質:經銷商

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下列是產品的訂購信息!產品僅用于科研

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超級雜交液(原位雜交)

Super hybrid   solution(In situ hybridization)

10mL

GOY-F10153

產品詳細介紹:

本產品為我司開發的即用型原位雜交專用核酸雜交液。既可以用于RNA原位雜交、DNA原位雜交,也可以用于FISH原位雜交等試驗。

原位雜交是在一定生物結構基礎之上的核酸雜交。這種結構基礎可以是一條染色體;一個細菌;更大結構基礎是細胞和組織。基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,通過氫鍵結合,形成DNA-DNADNA-RNARNA-RNA 雙鍵分子,應用帶有標記的(有放射性同位素,如3H35S32P、熒光素、等非放射性物質)DNARNA片段作為核酸探針,與組織切片或細胞內待測核酸(RNADNA)片段進行雜交,然后可用放射自顯影等方法予以顯示,在光鏡或電鏡下觀察目的mRNADNA的存在并定位;用原位雜交技術,可在原位研究細胞合成某種多肽或蛋白質的基因表達。此方法有很高的敏感性和特異性,可進一步從分子水平來探討細胞的功能表達及其調節機制。已成為當今細胞生物學、分子生物學研究的重要手段。

儲存條件:低溫運輸和-20℃保存、有效期一年。

DNA提取流程圖:

QQ截圖20220414142532.png

實驗步驟
(1)
實驗開始前將RNA提取液于65水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL80ul,50mL中加入300ul)
(2)
取約0.8g菌絲體(液體培養獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65
水浴3-10 min,期間混勻2-3
(4)
加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(5)
取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4,5 min)
(6)
加入1/4V體積10M LiCl溶液,4放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4
離心20min
(8)
棄上清,500ul SSTE溶解沉淀
(9)
::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1(10,000rpm,4,5min)
(10)
2V體積的無水乙,-70冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4
離心20 min
(12)
棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)
200ulDEPC處理水溶解
(14)
用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
(
在抽提過程中,若蛋白質含量或其它的雜質還較多,可以增加抽提次數)
操作步驟:
1.
勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅
b.
單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(3.5cm直徑的培養板)1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應根據培養板面積而定,不取決于細胞數。TRIzol加量不足可能導致提取的RNADNA污染。
c
.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2
.將勻漿樣品在室溫(15-30)放置5分鐘,使核酸蛋白復合物*分離。
3
.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質,脂肪,多糖或胞外物質(肌肉,植物結節部分等)可于2-810000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5.
每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8
10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅
7.
把水相轉移到新管中,如要分離DNA和蛋白質可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8
10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側和管底出現膠狀沉淀。移去上清。
兔損傷分子-1(rabbit Kim-1)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  5'-O-Dimethoxytrityl-N-benzoyl-desoxycytidine  67219-55-0  中文名:5'-O-(4,4'-二甲氧基三)-N(4)-苯甲酰基-2'-脫氧胞苷  分子式:C37H35N3O7 

兔素(Renin)ELISA試劑盒     5-Benzyl D-glutamate  2578-33-8  中文名:D-5-苯甲酯  分子式:C12H15NO4  度:98.0%   

兔素(Renin)ELISAKit     5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名:5-苯甲酰基戊酸  分子式:C12H14O3  度:98.0%   

兔素(rabbit Renin)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  4-Aminosalicylic acid  中文名:4-氨基水楊酸  分子式:C7H7NO3  度:98.0%

兔瘦素(rabbit Leptin)   作用:   ELISA   規格:   48T/96T   進口分裝  5-Hydroxymethylfurfural  中文名:5-羥甲基糠醛  分子式:C6H6O3  度:%
克螨特標準溶液(1.00mg/ml)  Propargite solution  質量規格:1.00mg/ml 人鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA檢測試劑盒Humanvoltage-gatedcalciumchannel,VGCCELISAKit 96T/48T

三氯殺蟲酯標準溶液(10μg/ml,u=2%)  Plifenat solution  質量規格:10μg/ml,u=2% 大鼠血栓素合成酶(TXAS)試劑盒 Rat thromboxane syhase,TXAS ELISA Kit

三氯殺蟲酯標準溶液(100μg/ml,u=2%)  Plifenat solution  質量規格:100μg/ml,u=2% 英文名稱RatTumornecrosisfactorαELISAKIT大鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)ELISAKIT規格:96T/48T

霜霉威(分析標準品,99%)  Propamocarb  質量規格:分析標準品,99% 肝素(heperin)活性比色法定量檢測試劑盒20

解毒喹(標準品)  Cloquintocet-mexyl  質量規格:分析標準品 ELISAKitPCDH1人原鈣黏素1規格:48T/96T

綠麥隆標準溶液(100μg/ml,u=4%)  Chlortoluron solution  質量規格:100μg/ml,u=4% 小鼠克拉拉細胞蛋白16(CC16)ELISA試劑盒 ,英文名: CC16 ELISA Kit

敵草隆(99%)  Diuron  質量規格:0.99 人抗鼠抗體(HAMA)ELISA檢測試劑盒Humanaimousaibody,HAMAELISA 96T/48T

四螨嗪(分析標準品,98.6%)  Clofentezine  質量規格:分析標準品,98.6% 大鼠血栓素B2(TXB2)試劑盒 Rat Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit

非草隆(標準品)  Fenuron  質量規格:分析標準品 英文名稱RatGCP-2ELISAKit大鼠中性粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2)規格:96T/48T

(B9)(標準品)  Daminozide  質量規格:分析標準品 肝素(heperin)纖維蛋白檢測法(Fibrometer)分析試劑盒50
超級雜交液(原位雜交)細胞PKD2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織PKCι激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞PKCι激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

組織PKCθ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C

細胞PKCθ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C


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