蛋白表達(dá)及純化：

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中，通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分（細(xì)胞或培養(yǎng)上清）。

3.通過(guò)親和，離子交換，疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容：純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽（Tag）或切除純化標(biāo)簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達(dá)90%以上。

產(chǎn)品屬性：

英文名稱：Recombinant Arachidonate-12-Lipoxygenase (ALOX12)

LOX12; 12-LOX; ALOX-12; 12-LO; 12LPG; LOG12; Lipoxygenase 12; 12S-lipoxygenase; Lipoxin synthase 12-LO; Platelet-type lipoxygenase 12

型號(hào)：GOY-01D1930

酶與激酶

代謝通路

神經(jīng)科學(xué)

發(fā)育科學(xué)

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測(cè)分子量：38.3kDa

實(shí)際分子量：38kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽：Phe352~Cys656 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 90%

等電點(diǎn)：7.0

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關(guān)產(chǎn)品：

CD26分子(CD26)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 26 (CD26)CD26; ADA; DPPIV; DPP-IV; DPP4; ADABP; ADCP2; TP103; Adenosine Deaminase Complexing Protein 2; T-cell activation antigen CD26; Dipeptidyl Peptidase IV物種：Rat，大鼠

CD38分子(CD38)重組蛋白英文名稱：Recombinant Cluster Of Differentiation 38 (CD38)cADPRH; ADPRC 1; c-ADPRH; T10; p45; 2'-phospho-ADP-ribosyl cyclase/2'-phospho-cyclic-ADP-ribose transferase; ADP-ribosyl cyclase 1物種：Rat，大鼠

芳基酯酶B(ARSB)重組蛋白英文名稱：Recombinant Arylsulfatase B (ARSB)ASB; G4S; N-acetylgalactosamine-4-sulfatase物種：Human，人

操作步驟：

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1． 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；

2． 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞，將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4． 細(xì)胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺(tái)上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品：

3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框33抗體 C3orf33 0.2ml

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體 C11ORF16 0.2ml

FAM70A蛋白抗體 FAM70A 0.2ml

原鈣粘附蛋白12/血管內(nèi)皮鈣粘蛋白2抗體 PCDH12 0.2ml

軸絲動(dòng)力蛋白重鏈9抗體 DNAH9 0.2ml

磷酸化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 phospho-Smad3(Ser204) 0.1ml

G蛋白激活內(nèi)流鉀通道蛋白2抗體 GIRK2/Kir3.2 0.2ml

鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體 CaMK2a 0.1ml

細(xì)胞表面趨化因子受體2抗體 CCR-2/CD192 0.1ml

CD33抗體 CD33/Siglec-3 0.1ml

細(xì)胞毒性受體NK-p44抗體 CD336/NKp44/NCR2 0.2ml

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體 Phospho-CHK2 (ser516) 0.1ml

花生四烯酸-12-脂加氧酶(ALOX12)重組蛋白人膜醭畢赤酵母   酯

紫色孢囊桿菌   

Herbaspirillumaurantiacum   模式菌株

Sphingomonasfennica   模式菌株

朝鮮芽孢八疊球菌   模式菌株

大腸桿菌   多重耐藥

巨大芽孢桿菌   

Sphingomonasjaponica   模式菌株

Gramellaechinicola   模式菌株

Hyphomonasadhaerens   模式菌株。胞外多糖粘附活性。

土白蟻叢毛單胞菌   模式菌株

屎腸球菌(屎鏈球菌)   模式菌株

單核增生李斯特菌   質(zhì)量控制菌種