蛋白表達及純化：

1.培養500ml哺乳動物細胞，然后將重組質粒轉染到細胞中，通過瞬時表達產生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養上清）。

3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

交付內容：純化好的目標蛋白及純化報告。可按客戶要求提供含純化標簽（Tag）或切除純化標簽（Tag）的最終蛋白，純度最高可達90%以上。

產品屬性：

英文名稱：Recombinant Cyclin Dependent Kinase 6 (CDK6)

PLSTIRE; Cell division protein kinase 6; Serine/threonine-protein kinase PLSTIRE

型號：GOY-01D1937

酶與激酶

代謝通路

腫瘤免疫

發育科學

物種：Homo sapiens (Human，人)

來源：原核表達

宿主E.coli

內毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位：：細胞核, 細胞質

預測分子量：40.6kDa

實際分子量：41kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽：Met1~Ala326 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl, pH8.0, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀：凍干粉

純度：> 95%

等電點：6.0

應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規格10μg50μg200μg1mg5mg

以下是相關產品：

Rho家族GTP酶1(RND1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Rho Family GTPase 1 (RND1)ARHS; RHO6; RHOS; Ras Homolog Gene Family Member S; Rho-related GTP-binding protein Rho6物種：Human，人

酯酶1(SULF1)重組蛋白英文名稱：Recombinant Sulfatase 1 (SULF1)HSULF-1; Extracellular sulfatase Sulf-1物種：Human，人

拓撲異構酶Ⅱ(2)重組蛋白英文名稱：Recombinant oisomerase II (2)DNA oisomerase 2-alpha; DNA oisomerase II, alpha isozyme物種：Rat，大鼠

操作步驟：

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

2．  每100mg固體組織置于培養皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；

3． 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉/分，4℃離心5 min；

4． 取上清轉移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養細胞蛋白提取

1． 貼壁培養的細胞，吸去培養基后，加入10mL/150mm培養板的冷PBS洗兩次，每次振搖數次以盡量去除培養液；

2． 懸浮培養的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養液移至離心管中， 1000轉/分離心10 min，再用10mL/150mm培養板的冷PBS，1000轉/分離心5 min洗兩次；

3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數分鐘待用。

4． 細胞洗滌后，轉至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：

5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；

6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；

7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

公司正在出售的產品：

轉胺酶2抗體 TGM2/TG2/Transglutaminase 2 0.1ml

甲胎蛋白單克隆抗體(檢測) AFP(A4) 0.2ml

結合蛋白抗體 RBP/Retinol binding protein 0.1ml

S100P結合蛋白抗體 S100PBP/S100P binding protein 0.2ml

調控周期蛋白依賴蛋白激酶SEI1抗體 Sertad1 0.1ml

骨形態發生蛋白9抗體 BMP9 0.2ml

轉錄延伸調節蛋白1抗體 TCERG1/CA150 0.1ml

蛋白激酶受體A8抗體 EphA8/Eph receptor A8 0.2ml

腦特異性血管生成抑制蛋白2抗體 BAI2/Brain Specific Angiogenesis Inhibitor 2 0.2ml

E3泛素蛋白連接酶144B抗體（環指蛋白144B） IBRDC2/RNF144B 0.2ml

DSCC1蛋白抗體 DSCC1 0.2ml

核結構蛋白5抗體 NSP5 0.2ml

周期素依賴性激酶6(CDK6)重組蛋白人產紫青霉   

無花果曲霉   

靈芝(紅芝，赤芝)   藥用

奇異翅孢殼   產抗生菌素

青枯假單胞菌   柳桉青枯病病源菌

粉狀畢赤酵母   的單細胞蛋白

孢囊桿菌   

生香毛霉   

路德類酵母   

膠紅酵母   

藤黃色鏈霉菌   

地衣形芽孢桿菌   產堿性