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技術(shù)文章
干細(xì)胞重編程并不是我們想象的那樣
2018
5-10一項(xiàng)研究指出，干細(xì)胞重編程的發(fā)生與我們的想象并不*一樣。西班牙國家癌癥研究中心CNIO的研究團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)，組織損傷是細(xì)胞回到胚胎狀態(tài)的一個(gè)關(guān)鍵因素。受損細(xì)胞會(huì)給旁邊的細(xì)胞發(fā)送信號(hào)使其獲得胚胎特性，進(jìn)而促成組織修復(fù)。iPS細(xì)胞重編程為山中伸彌贏得了諾貝爾獎(jiǎng)，也打開了再生醫(yī)學(xué)的大門。該技術(shù)通過引入OSKM四個(gè)基因，使成體細(xì)胞回到胚胎狀態(tài)，轉(zhuǎn)變?yōu)槎嗄芗?xì)胞。ManuelSerrano及其團(tuán)隊(duì)分析了在活組織中用OSKM誘導(dǎo)重編程的過程。他們看到的現(xiàn)象改變了迄今為止人們對這一過程的普遍認(rèn)識(shí)。...+ -
技術(shù)文章
干細(xì)胞放化療后再生的正調(diào)控作用
2018
5-8研究工作揭示了骨髓脂肪細(xì)胞對造血干細(xì)胞放化療后再生的正調(diào)控作用，顛覆了過去脂肪細(xì)胞作為造血抑制物的經(jīng)典認(rèn)識(shí)。周波研究員為論文*作者和共同通訊作者，SeanJ.Morrison教授為論文另一共同通訊作者。研究同時(shí)被評為下期《NatureCellBiology》雜志封面文章。成年人腿骨中50%以上的空間被脂肪占據(jù)，這一比例在衰老或疾病發(fā)生后會(huì)進(jìn)一步增加。骨髓脂肪細(xì)胞數(shù)量與生理或病理性骨髓抑制具有高度的相關(guān)性。因此，一直以來，脂肪細(xì)胞抑制骨髓造血被作為教科書般的常識(shí)。周波等人的工作...+ -
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ATCC細(xì)胞的原代提取
2018
4-26目前，ATCC細(xì)胞的分離方法主要有三種：無血清培養(yǎng)基自然篩選法、流式細(xì)胞術(shù)分選法、免疫磁珠分選法。無血清培養(yǎng)基自然篩選法是迄今應(yīng)用，也是zui簡單和容易操作且行之有效的方法。其原理是利用特殊的培養(yǎng)基使成熟的神經(jīng)細(xì)胞無法較長時(shí)間地成活，而分離篩選出能夠在該培養(yǎng)條件下存活并繁殖的神經(jīng)干細(xì)胞群體。步驟：（1）取胎腦；（2）用吸管吹吸使細(xì)胞分散均勻；（3）加小鼠神經(jīng)干*培養(yǎng)基培養(yǎng)。脂肪間質(zhì)干細(xì)胞分離培養(yǎng)脂肪干細(xì)胞主要是通過膠原酶進(jìn)行消化，獲得細(xì)胞懸液。分離培養(yǎng)大鼠脂肪間質(zhì)干細(xì)胞的大致...+ -
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干細(xì)胞不飽和脂質(zhì)水平更高
2018
4-17“我們的研究表明，與非癌癥干細(xì)胞相比，卵巢癌干細(xì)胞中的不飽和脂質(zhì)水平顯著增加，”Cheng表示，“傳統(tǒng)方法不能進(jìn)行單細(xì)胞分析，如果信號(hào)位于非常微小的區(qū)域，就不太容易通過常規(guī)生化檢測方法觀察，通過受激拉曼顯微鏡，我們可以通過代謝標(biāo)志更好地確定這些細(xì)胞。在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的卵巢癌干細(xì)胞和來自人類患者的細(xì)胞中均鑒定出了脂質(zhì)去飽和信號(hào)。在富集癌干細(xì)胞的腫瘤球體實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)物中也能夠檢測到較高的不飽和脂水平。研究人員使用化學(xué)物質(zhì)抑制去飽和酶的活性，并降低細(xì)胞的“干性”（stemness），削弱...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞的新測試
2018
4-12轉(zhuǎn)化細(xì)胞新的測試，稱為"多能測試"（PluriTest），具有收效大、、無需動(dòng)物展開的多能性測試/特點(diǎn)。使用微陣列技術(shù)，能同時(shí)對數(shù)以千計(jì)不同的DNA序列進(jìn)行分析。斯克里普斯研究小組開創(chuàng)了關(guān)于所有基因信息的大型數(shù)據(jù)庫，這些基因活躍在正常的人體胚胎干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞和許多的非多能細(xì)胞系中。對于多能測試，這個(gè)數(shù)據(jù)庫對正常多能干細(xì)胞系建立了詳細(xì)的分子模型。Loring說，與使用小的生物標(biāo)志檢測細(xì)胞的診斷測試不同，分子模型的方法使用了微陣列中的數(shù)千條信息。這個(gè)診斷測試的結(jié)果具有高度...+ -
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裝滿培養(yǎng)液的干細(xì)胞如何處理?
2018
4-10很多人都會(huì)遇到從其他地方買來干細(xì)胞或者快遞運(yùn)來細(xì)胞，裝滿培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶的細(xì)胞怎么處理的問題。第1步：先放37℃培養(yǎng)箱放置4小時(shí)，這樣細(xì)胞在通過長途跋涉以后得以穩(wěn)定，觀察細(xì)胞狀態(tài)。第2步：將新鮮培養(yǎng)基和舊的培養(yǎng)基1:1稀釋，如果細(xì)胞狀態(tài)不好，可以將血清濃度提到15%，否則正常培養(yǎng)，這樣有一個(gè)過渡期，不至于細(xì)胞換血清之后狀態(tài)不佳，15%的血清培養(yǎng)48h之后換成正常濃度培養(yǎng)。細(xì)胞胞質(zhì)疏松，狀態(tài)不好，養(yǎng)不起來，怎么辦?策略1：一般情況下，從血清下手就行，要么換好血清，要么提高血清濃度...+ -
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ATCC細(xì)胞如何正確分離
2018
4-8ATCC細(xì)胞分裂是指細(xì)胞分裂為兩個(gè)相同副本的過程。普通人的一生中要經(jīng)歷無數(shù)次的這一過程。為了生成兩個(gè)*相同的副本，細(xì)胞必須地分離它們的染色體，這一事件依賴于稱之為動(dòng)粒（kinetochore）的專門結(jié)構(gòu)將染色體雙向附著到紡錘體微管上。在細(xì)胞分裂的早期階段，動(dòng)粒結(jié)合紡錘體微管會(huì)發(fā)生許多的錯(cuò)誤。正常的細(xì)胞能夠有效地糾正這些錯(cuò)誤，確保染色體正確分離。而癌細(xì)胞通常不會(huì)糾正這些錯(cuò)誤，使得子細(xì)胞染色體數(shù)目異常，從而幫助這些癌細(xì)胞抵抗化療。達(dá)特茅斯Geisel學(xué)院生物化學(xué)教授Compton...+ -
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ATCC細(xì)胞核移植技術(shù)
2018
4-3ATCC細(xì)胞從2-4月齡成熟母鼠獲得，未成熟支持細(xì)胞從0-5日齡未成熟雄鼠獲得。卵丘細(xì)胞通過透明質(zhì)酸酶脫顆粒細(xì)胞獲得。未成熟睪支持細(xì)胞獲得方法如下：取下的小鼠睪用0.1mg/ml膠原酶與0.01mg/ml脫氧核糖核酸酶37℃處理30min，然后用0.2mg/ml胰蛋白酶37℃處理5min，去睪懸液即可。睪懸液用含4mg/mlBSA的PBS洗一下就可用于顯微注射了。未成熟睪細(xì)胞根據(jù)其體積與形態(tài)即可確認(rèn)。MII期受體卵母ATCC細(xì)胞在37℃條件下去核，操作液為含5µg...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞外源基因?qū)氲脑砗筒僮鞑襟E
2018
3-29轉(zhuǎn)化細(xì)胞實(shí)驗(yàn)試劑1.細(xì)胞營養(yǎng)液（DMEM液體培養(yǎng)基，10％胎牛血清，雙抗100單位/ml），消化液（0.05％胰酶，0.53mMEDTA·Na），Hank’s液。2.2×HBS液（280mMNaCl,10mMKCl,1.5mMNaHPO4·2H2O,12mM葡萄糖，50mMHepes，pH7.05,0.2μ過濾除菌），CaCl2（2.5M，0.2μ過濾除菌）溶液，超純水（滅菌）。3.PBS，蛋白酶K，NP40，RNaseA，無水乙醇，酚，DNA上樣緩沖液，瓊脂糖，TAE電泳緩...+ -
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干細(xì)胞療法有助于視力恢復(fù)
2018
3-27英國兩名“濕性”老年性黃斑變性患者接受胚胎干細(xì)胞療法治療，原本幾近失明的眼睛恢復(fù)視力，能夠視物、閱讀，為治療這種常見眼疾帶來希望。黃斑是視網(wǎng)膜的重要區(qū)域。“濕性”老年性黃斑變性患者的視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞因血管滲漏受損，造成視力模糊不清，嚴(yán)重時(shí)失明。英國穆爾菲爾德眼科醫(yī)院利用人體胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)出視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞，將它嵌入一個(gè)支架中，形成一張40微米厚、6毫米長、4毫米寬的“補(bǔ)丁”。然后，他們把這張活細(xì)胞補(bǔ)丁植入患者失明眼睛的黃斑后，替代原來的病變細(xì)胞。整個(gè)手術(shù)耗時(shí)兩小時(shí)。研究人...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞電融合的原理和方法
2018
3-22轉(zhuǎn)化細(xì)胞實(shí)驗(yàn)?zāi)康膭?dòng)物的游離細(xì)胞以及植物成微生物去壁后的原生質(zhì)體，在電刺激下進(jìn)行細(xì)胞融合，且融合率高、無毒性，操作簡便及融合后的細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)成活率高等優(yōu)點(diǎn)，是細(xì)胞工程手段的又一進(jìn)展。實(shí)驗(yàn)原理將制備的游離細(xì)胞或原生質(zhì)體，置于電融合室中，在高頻交流電場的作用下，細(xì)胞被極化，成為偶極子，造成細(xì)胞之間相互連接，如果施加的高頻交流電壓(即正弦波的p-p值)過高或作用時(shí)間過長，則細(xì)胞連接成串珠狀，應(yīng)適當(dāng)控制以上條件，盡量使兩細(xì)胞處于點(diǎn)接觸狀態(tài)，然后施加方波脈沖予以刺激，由于電脈沖的瞬間作用...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞修復(fù)特定基因
2018
3-20轉(zhuǎn)化細(xì)胞這項(xiàng)研究對于人類健康來說具有重要的意義，而且對于理解腫瘤的發(fā)育過程中細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生的改變十分有用。MMR缺陷將導(dǎo)致細(xì)胞變得更具腫瘤特性，這可能是與偶遇MMR缺陷的細(xì)胞缺少保護(hù)基因以及降低突變風(fēng)險(xiǎn)的相關(guān)機(jī)制。研究者們目前并沒有向這一方向拓展的想法，但如果有人愿意深入研究的話將是十分有意義的事情。這項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)MMR能夠特異性地修復(fù)特定基因，而不是對基因組上的非基因位點(diǎn)進(jìn)行修復(fù)。這一發(fā)現(xiàn)將極大程度上促進(jìn)我們對物種利用MMR修復(fù)基因突變的理解。“雖然基因?qū)τ谖锓N的生物學(xué)功能的實(shí)...+
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