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技術(shù)文章
干細(xì)胞的基因測序
2018
3-13研究人員首先進(jìn)行了結(jié)腸癌干細(xì)胞的基因測序，并使用小鼠模型及病人來源腫瘤細(xì)胞的3D細(xì)胞培養(yǎng)模型進(jìn)行了功能研究。他們的研究發(fā)現(xiàn)腫瘤干細(xì)胞的生存由一個特殊的刺猬信號通路（SHH-PTCH1）控制，這個通路允許細(xì)胞對外部抑制干細(xì)胞分化的信號產(chǎn)生反應(yīng)。“將靶向抑制刺猬信號通路的療法與其他縮小腫瘤的療法結(jié)合，可能會為清除腫瘤干細(xì)胞并防止復(fù)發(fā)提供新策略，”Regan博士說道。相似的靶向刺猬信號通路的研究也在胰腺癌、乳腺癌等模型中取得了令人振奮的結(jié)果。“未來的研究將旨在確定該信號通路的下游信...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞增殖生長方面實(shí)驗(yàn)
2018
3-8測定轉(zhuǎn)化細(xì)胞增長數(shù)值常用zui簡便的方法。一般過程為1.接種21孔/24孔板細(xì)胞（如用培養(yǎng)瓶時則21瓶）。2.分7組，每組3孔（或瓶），培養(yǎng)一周（7天），期間逐日檢測一組，計(jì)數(shù)。3.把7天中的細(xì)胞數(shù)值繪成圖，即為細(xì)胞生長曲線。實(shí)驗(yàn)材料細(xì)胞試劑、試劑盒胰蛋白酶儀器、耗材吸管實(shí)驗(yàn)步驟1.懸液制備取待測生長狀態(tài)良好細(xì)胞，增長至接近匯合時，向培養(yǎng)瓶內(nèi)加1ml升0.25%胰蛋白酶液，37℃溫箱中消化，至細(xì)胞接近脫離瓶壁前吸出消化液、加新的培養(yǎng)液、輕吹打制備成細(xì)懸液、計(jì)數(shù)；2.接種向每孔...+ -
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ATCC細(xì)胞獲得無限表達(dá)所需是試劑
2018
3-6(1)ATCC細(xì)胞瞬時表達(dá)：通常可以使蛋白在細(xì)胞中暫時表達(dá)數(shù)天到數(shù)周。瞬時表達(dá)常用于驗(yàn)證cDNA是否能夠指導(dǎo)蛋白的合成，比較表達(dá)同一蛋白的不同載體的有效性，在進(jìn)行建立穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的細(xì)胞系之前，通過瞬時表達(dá)來驗(yàn)證重組表達(dá)載體的正確性是十分必要的。然而，瞬時表達(dá)難以按比例產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)(1mg)，此外，整個細(xì)胞群體中只有部分細(xì)胞暫時得到蛋白表達(dá)，不利于細(xì)胞表型的研究。(2)穩(wěn)定表達(dá)：通過利用共轉(zhuǎn)染的標(biāo)記篩選系統(tǒng)，如G418等，對DNA轉(zhuǎn)染后的哺乳動物細(xì)胞進(jìn)行選擇，使質(zhì)粒DNA穩(wěn)定整合...+ -
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干細(xì)胞在人體中有多種組織來源
2018
3-1近年來，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)成人干細(xì)胞在人體中有多種組織來源，其中包括胎盤組織。來自Celularity公司的科研人員認(rèn)為，與其他組織來源的干細(xì)胞相比，胎盤干細(xì)胞更為重要，胎盤干細(xì)胞不僅免疫原性很低，同時還具有免疫調(diào)控作用；胎盤干細(xì)胞可在直系親屬間使用，對配型的要求低；此外，胎盤干細(xì)胞含量豐富，用于治療可能會更加便宜。羅伯特·哈里里是一名工程師、外科醫(yī)生和企業(yè)家，于1998年開始從事胎盤干細(xì)胞的研究工作。他向媒體表示，迄今為止，這家創(chuàng)業(yè)公司已經(jīng)進(jìn)行了幾次臨床試驗(yàn)，下一步是嘗試向FDA提...+ -
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ATCC細(xì)胞突觸形成的作用
2018
2-27ATCC細(xì)胞在大腦的免疫系統(tǒng)中起作用，而且免疫信號通過位于這些細(xì)胞表面上的受體與大腦進(jìn)行溝通。美國加州大學(xué)舊金山分校精神病學(xué)助理教授AnnaMolofsky博士和實(shí)驗(yàn)室醫(yī)學(xué)助理教授AriMolofsky博士正在研究在正常情形下，這兩個過程在大腦發(fā)育過程中如何發(fā)生，以便希望確定平衡的微妙變化如何導(dǎo)致神經(jīng)發(fā)育障礙。在一項(xiàng)新的研究中，由AnnaMolofsky和AriMolofsky領(lǐng)導(dǎo)的一個研究團(tuán)隊(duì)證實(shí)一種被稱作白細(xì)胞介素33（IL-33）的免疫信號在允許大腦在中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CN...+ -
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腫瘤細(xì)胞表面染色
2018
2-24收集各組腫瘤細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，加入適量WashBuffer液洗滌，1500rpm離心5min，去上清，加入50μlWashBuffer重懸。（可選）Livedead染色，每管加0.1μLZombieGreenTMDye（樣品多時使用時可先稀釋），震蕩混勻，室溫避光孵育10～15min。WashBuffer液洗滌，1500rpm離心5min，棄上清。封閉Fc受體：每管中加入1μg/106細(xì)胞Anti-MouseCD16/CD32抗體封閉熒光抗體Fc受體引起的非特異性染色。震蕩...+ -
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如何選擇性消滅干細(xì)胞？
2018
2-10干細(xì)胞在的研究中，科學(xué)家們將研究重點(diǎn)放在一個備受關(guān)注的纖維化疾病上——自發(fā)免疫性硬皮癥（autoimmuneconditionscleroderma）。這種疾病的患者常常面臨皮膚增厚、纖維化至硬化、萎縮，而且這種退行性病變會進(jìn)一步危害肺、心臟、腎臟等器官。疾病晚期，不少患者會因?yàn)榉尾渴軗p、窒息而死。他們專注于zui核心的挑戰(zhàn)：如何“誘導(dǎo)”肌成纖維細(xì)胞自我凋亡？有意思的是，他們發(fā)現(xiàn)，在肌成纖維細(xì)胞造成硬皮癥過程中，線粒體會表達(dá)一種引發(fā)凋亡程序的關(guān)鍵蛋白——BIM。但是，成纖維細(xì)...+ -
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維持ATCC細(xì)胞恢復(fù)的策略
2018
2-8ATCC細(xì)胞是一類位于血管內(nèi)壁的特殊類型細(xì)胞，其通常會形成動脈、靜脈和毛細(xì)血管，長期以來內(nèi)皮細(xì)胞都被認(rèn)為是血液的被動通道。人類機(jī)體的造血系統(tǒng)通常負(fù)責(zé)產(chǎn)生人類一生所需要的血液細(xì)胞，如今我們也知道，隨著年齡增長人類的造血系統(tǒng)功能也會隨之下降；所有的血細(xì)胞都來自于一種分級系統(tǒng)，而其共同的祖先細(xì)胞就是造血干細(xì)胞，在一個人的一生中，這些造血干細(xì)胞會持續(xù)供應(yīng)人類機(jī)體所需要的所有類型細(xì)胞，包括不同類型的免疫細(xì)胞等。隨著機(jī)體衰老，血液干細(xì)胞也并不太會*地發(fā)揮自身的功能了，這就會導(dǎo)致65歲以上...+ -
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促進(jìn)干細(xì)胞生存有效途徑
2018
2-6干細(xì)胞自噬是真核生物中相對保守的一種亞細(xì)胞途徑，其分子機(jī)制非常復(fù)雜且高度保守。細(xì)胞自噬與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞衰老一樣，是十分重要的生物學(xué)現(xiàn)象，參與生物的發(fā)育、生長等多種過程。自由基氧、線粒體損傷和細(xì)胞漿的Ca2+一等共同誘因可以導(dǎo)致細(xì)胞自噬、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞衰老。在正常條件下，雷帕霉素靶蛋白(mammaliantargetofrapamycin，mTOR)途徑介導(dǎo)細(xì)胞自噬，這有助于細(xì)胞適應(yīng)壓力，促進(jìn)細(xì)胞的生存。但是細(xì)胞的自噬、凋亡和衰老之間的關(guān)系較為復(fù)雜。例如阻斷細(xì)胞自噬可能加強(qiáng)細(xì)胞...+ -
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Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞產(chǎn)品的運(yùn)輸和保存
2018
2-1Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞詳述肺泡組織是機(jī)體暴露于外界環(huán)境的zui大表面，哺乳動物肺臟由40多種不同類型細(xì)胞組成Ⅱ肺泡上皮細(xì)胞，為小的，立方形細(xì)胞，胞體較小，核圓，占上皮細(xì)胞的60%左右，占所有肺細(xì)胞的15%左右，但僅覆蓋5%的肺泡表面。處于小內(nèi)皮和間質(zhì)細(xì)胞、大的巨噬細(xì)胞和Ⅰ型細(xì)胞之間。細(xì)胞特性1)組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常肺組織。2)細(xì)胞鑒定：肺表面活性蛋白A(SP-A)免疫熒光染色為陽性。3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。5...+ -
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干細(xì)胞能持續(xù)保持分裂功能
2018
2-1肌營養(yǎng)不良癥的干細(xì)胞治療發(fā)展，其實(shí)并不順利，擺在科學(xué)家們面前的一大難題是，雖然干細(xì)胞能夠分化出特定組織的新細(xì)胞，但是，干細(xì)胞一旦分化為肌纖維，就停止了分裂，這就引起再生組織不足，因此無法進(jìn)行有效的移植。UBC生物醫(yī)學(xué)研究中心和生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)院的遺傳學(xué)教授FabioRossi博士說：“干細(xì)胞雖然能分化成任意種類的細(xì)胞，但是一旦分化成特定細(xì)胞，就無法繼續(xù)分化成其他細(xì)胞了。我們希望干細(xì)胞能持續(xù)保持分裂功能而不進(jìn)行分化，只有這樣他們才能繼續(xù)增殖，產(chǎn)生足夠的干細(xì)胞，使我們得到足夠的再生...+ -
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轉(zhuǎn)化細(xì)胞早期分化中去抑制的基因
2018
1-30轉(zhuǎn)化細(xì)胞是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的多能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細(xì)胞。Oct4、Nanog、Sox2等多能性相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子通過自調(diào)節(jié)或反饋調(diào)節(jié)等方式調(diào)控胚胎干細(xì)胞的自我更新和分化。2008年,Chen等用ChIP-Seq檢測了Nanog、Oct4、STAT3、Smad1和Sox2等13個序列特異性的轉(zhuǎn)錄因子與基因組DNA的結(jié)合情況。這些轉(zhuǎn)錄因子都是LIF和BMP途徑的重要調(diào)控分子,發(fā)現(xiàn)有些位點(diǎn)是幾個轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合共同起調(diào)節(jié)作用,如Nanog、Sox2、...+
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