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干細胞基因控制骨骼肌再生的研究
研究人員通過干細胞研究發現,Prox1基因或許也有黑暗的一面,比如其在結直腸癌的發生過程中扮演著重要的作用。如今研究者發現,名為衛星細胞的骨骼肌干細胞同樣能夠表達Prox1基因,而且當該基因處于活化狀態時衛星細胞能夠分化為肌肉纖維。研究者指出,我們在成年人的慢肌纖維中也能夠發現Prox1基因的表達,機體中的慢肌纖維具有良好的耐力和高度的代謝活性,成人機體中大約有一半的骨骼肌都是慢肌纖維肌肉,研究者Kivela說道,在小鼠機體中,Prox1基因能夠將快肌纖維轉換為慢肌纖維,而剔...
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揭密ATCC細胞的致命弱點
研究發現了ATCC細胞的弱點。他們發現了一種名為5-脂氧合酶(5-LO)的酶類在急性髓性白血病干細胞的生存過程中扮演著重要角色。此前研究人員已經發現了5-LO在炎性疾病比如哮喘癥發病中的角色,研究者JessicaRoos教授表示,這項研究中我們發現,急性髓性白血病亞群中的白血病干細胞或許可以被5-LO抑制劑有效地選擇性攻擊,而且這種現象均可以在細胞培養基模型和白血病小鼠模型中觀察到。研究者表示,這項研究為開發新型的5-脂氧合酶抑制劑來抑制白血病的存貨,從而為抑制并治療急性髓性...
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如何做到無菌環境培養ATCC細胞
我們在做ATCC細胞培養時,是必須要在無菌的環境下進行的,那細胞培養所需的無菌環境,我們如何做到呢?一、無菌室無菌室的結構:一般由更衣間、緩沖間、操作間三部分組成。無菌室的消毒和防污染:為保持無菌狀態,經常消毒是必要的,通常采用每日(使用前)紫外照射(1-2小時),每周甲醛、乳酸、過氧乙酸熏蒸(2小時)和每月新潔爾滅擦拭地面和墻壁一次的方式進行消毒。實際工作中,要根據無菌室建筑材料的差異來選擇合適的消毒方法。此外,還應注意防止無菌室的污染。造成無菌室污染的可能包括:送入無菌室...
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腫瘤細胞實驗中標記蛋白有哪些優點
腫瘤細胞實驗中標記蛋白在測定過程中,具有一定的優點。這些優點為我們做實驗提供便捷快速的服務流程,作為標記物一般用于兩個目的:①蛋白檢測:即標記物的引入使得能夠檢測細胞表達系統中的標記蛋白,從而可對蛋白的功能、蛋白質在細胞的定位以及相互作用和生化活性進行研究;②蛋白純化:即選擇一種可以與某種固相化配體結合的標記物,從而可以從細胞抽提物中批量純化蛋白。標記蛋白具有許多優點。原則上,該方法為檢測各種細胞成分中感興趣的蛋白提供廠新的手段。①如果開放閱讀框已經被克隆化,但是由于蛋白是新...
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ATCC細胞支原體污染的熒光檢測方法
ATCC細胞利用螢光染劑(bisbenzimide,Hoechst33258)偵測支原體污染。此染劑會結合到DNA之Adenosine-Thymidine(A-T)rich區域,因為支原體之DNA中A-T含量占多數(55~80%),所以可將其染色而偵測。被支原體污染之細胞經染色后,在細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一之螢光小點,即為支原體之DNA,證明有支原體之污染。測試步驟用間接步驟,將待測細胞懸浮液或細胞培養液接種于指示細胞培養液中(indicatorcell,例如Ve...
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簡單實用的ATCC細胞凍存方法
ATCC細胞凍存液:一般用10%DMSO(推薦用sigema原裝的,質量好不用預消毒)+10%血清的*培養基,如果細胞珍貴的話用10%DMSO+90%全血清。降溫方法:用zui少兩厘米厚的醫用棉紗將凍存管緊緊包裹,扎緊,直接放入-70度冰箱,隔夜取出凍存管直接放液氮凍存。復蘇效果對比:細胞凍存2周后復蘇,本方法凍存的細胞與使用程序性降溫儀凍存的細胞復蘇效果相差不大,但明顯比傳統4度、-20度、-70度的方法要好,傳統的凍存方法不但費時費力,而且各時間段的放置時間并無嚴格統一,...
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皮膚細胞將轉化為轉化細胞并保持活力
如今科學家們能夠利用多種方法將一種轉化細胞類型轉化成為其它細胞類型,其中所涉及的一種技術就是將成熟細胞轉化成為多能性干細胞,隨后利用化學混合制劑誘導多能干細胞使其分化成為所想要的細胞類型。在過去幾年里,科學家們開始開發一種折中的方法,這種方法能夠讓皮膚細胞“時光倒流”,以便皮膚細胞失去成熟細胞的特性,并且變得和干細胞一樣。研究者JaleesRehman指出,這種方法并不能讓細胞*恢復至多能干細胞的狀態,但卻可以使其進入到一種中間前體細胞的狀態,祖細胞能夠被大量培養用于再生醫學...
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ATCC細胞固定后之抗原修復
ATCC細胞大多數甲醛固定的組織在開始染色之前都需要先修復抗原,這是由于在固定過程中產生了亞甲基橋使蛋白之間交聯屏蔽了抗原位點。兩種抗原修復方法為熱修復法(稱之為熱誘導抗原表位修復或HIER)和酶解法。這些修復方法原理都是將亞甲基橋打斷,使抗原表位暴露出來,以便于抗體結合。有的抗原適合酶解修復,有的抗原適合熱修復。酶解修復有時會損壞組織的形態結構,因此需要摸索酶濃度和作用時間。熱修復法熱抗原修復方法有高壓蒸汽法、微波法或蒸煮鍋法。或者將玻片置于修復溶液中60°C水浴過夜。除非...
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ATCC細胞老化的表現及預防方式
ATCC細胞老化的原因和預防1)接種密度的影響:部分干細胞具有一定的分泌性能,能夠分泌一些對細胞有支持能力的因子類物質;所以必須維持一定的接種密度,否則會導致細胞增殖減慢,zui后出現老化;2)消化過度:消化細胞時會對細胞的表面蛋白有較強的損傷,所以消化的時間不能過長,使用合適濃度和pH值的消化酶,否則會導致細胞老化和分化;3)合適的密度的時候就要傳代:細胞如果過密,接觸抑制作用會導致細胞的活力減弱并影響增殖導致老化;4)使用合適的血清和培養基:不同的干細胞對培養基特別是血清...
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介紹腫瘤細胞四階段
腫瘤細胞的生命是一個持續更新、持續從頭開始的過程。從它的母細胞分裂開始,到它的子細胞形成或細胞自身死亡結束。而細胞周期就是指從一次細胞分裂形成子細胞開始,到下一次細胞分裂形成子細胞為止所經歷的過程。細胞在這種前期、生長、DNA復制和分裂等階段間循環。一直以來,區分細胞這4個階段并非易事,因為要同時對來自許多不同報告蛋白(作為報告基因的蛋白)的信號進行成像,在技術上是非常困難的。為了克服這一限制,美國斯坦福大學研究人員邁克爾·林及其同事,此次開發了一種名為mMaroon1的熒光...
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分析惡性生殖干細胞腫瘤分子開關
惡性生殖干細胞腫瘤是一種各個年齡段男女都可能罹患的癌癥,如睪丸癌、卵巢癌皆屬于此列。雖然目前的化療療法可在一定程度上治療該類疾病,但化療產生的副作用也很嚴重,會損害患者的聽力,造成腎臟、肺葉以及骨髓損傷。zui近,英國劍橋大學研究人員稱,一種名為LIN28的蛋白在惡性生殖細胞腫瘤的形成過程中起著重要作用,是促發癌癥的關鍵“開關”。這一發現對于開發新的惡性生殖細胞腫瘤治療方法具有重要意義。在該項研究中,劍橋大學研究人員發現,所有的惡性生殖細胞腫瘤中都含有大量的LIN28蛋白,該...
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ATCC細胞毒試驗的幾種方法
ATCC細胞毒試驗實在組織培養中研究淋巴細胞、抗體或抗體依賴性淋巴細胞殺傷靶細胞的一種技術,也是在體外研究特異性細胞免疫比較可靠和靈敏的方法,目前微量細胞毒試驗是應用zui廣的一種方法.(一)淋巴細胞對腫瘤細胞的細胞毒試驗方法:1)腫瘤細胞培養物制成懸液,并稀釋至需要的細胞濃度.2)于微量試驗班的小孔內分別接種0.2ml腫瘤細胞(內含5×102)個細胞,37℃培育24h.3)細胞貼壁后,輕輕輕去培養基,加1mlPBS洗滌,輕去洗滌液及未貼壁細胞.4)向小孔分別加入0.2ml不...
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